梅州万级 植物细胞培养净化无菌室净化工程

中净环球净化可提供实验室、GMP实验室、细胞实验室工程的咨询、规划、设计、施工、安装、改造等配套服务。
  实验室通风设计与舒适性空调系统的通风设计是有区别的，实验室通风设计有实验用的通风柜排风和室内平时排风两种。以前通风柜是作为实验台的设备，而目前实验台上进行的实验逐渐转移到了通风柜内，使用台数的日益增多，就要求通风柜具有适于实验使用的功能，要求通风柜具有排放功能、小倒流功能、隔离功能、补风功能等，不只是提供舒适的工作环境，减少人员暴露在危险空气下的可能，还要保证工作人员的身体健康，不造成伤害。通风柜的类别很多，包括实验台、边台、药品柜、器皿柜等，这些通风柜是实验室设备中重要的设备；但它并不是室内的排风装置，实验室还有平时排风口，布置在仪器室或产生危险物质的仪器上方。
  实验室通风柜排风与室内排风共用一套排风系统风管及风机。风机风速有三挡或为变频风机，低速时为室内平时排风，中速时为通风柜排风(1600m3/(台• h))，高速为室内平时排风加通风柜排风。风机设置在屋面，排风管为负压，完全避免有害气体在室内泄露。各通风系统均配有排风补风系统，低速排风时的补风由室内人员新风补充，通风柜补风量大，为避免大量抽用房间内空气，造成能源的浪费，采用了带补风的通风柜，补风由室外直接供给；补风管设电动风阀，与通风柜排风联动，通风柜排风时抽吸室外风补风；补风在柜内循环后排除室外，设计中大部分通风柜选用了上部排风和通风柜后侧补风的形式，虽然在控制上复杂一些，但为今后使用提供了便利。
  实验室的A声级噪声限制值为50dB，增加管道截面尺寸可以降低噪声，考虑到管道的经费和施工问题，大部分风量为1600m3/h的通风柜与实验室房间的管道、有平时排风要求的竖井的截面尺寸多数为350×400mm。实验室排出的有毒和酸碱腐蚀性较强的气体会对环境造成污染，在排入大气前根据气体的成分采取吸取、过滤等措施对其进行净化处理。
  对有洁净等级要求的负压实验室，既要保证洁净，又要保持负压。送入洁净间的风量为此房间排风量的70%~80%，并加定风量阀锁定送风量；排风机与空调机联锁运行，排风口处加定风量阀，以满足实验室压力梯度的要求；另外与正压实验室不同的是负压洁净实验室外的房间内仍要保证为同洁净等级，因此洁净空调其余20%~30%的风量送至实验室房间、非实验区域，使气流流向从安全区到产生危险物质的实验房间，既保证污染源不泄漏，又保证了实验室的洁净等级。
  对有洁净等级要求的正压实验室、回风与经过集中处理的新风混合后进入空调机组的洁净实验室，机组内设中效过滤，房间送风口设送风口，回风口处设空气阻尼层，气流组织采用上送侧回；通过调节回风阻尼层阻力调节回风量，以实现对洁净室的正压控制；在机组新风处设电动风阀，与洁净空调机组联锁；洁净实验室送风量通过缓冲间压出，在缓冲间外的实验室房间常配有通风柜排风和房间排风，满足各房间的压力梯度。

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  万级无菌实验室利用送、回风量维持房间压差；送风经初、中、过滤后送入室内，回风比例为80%，新风比例为20%；从保温角度考虑实验室的围护及吊顶结构采用厚度为50mm的净化实验室彩钢板，优点：机械强度高，隔热、隔音、防潮性能好、平整光滑、耐腐蚀、易清洁、安装方便；顶棚及板壁的墙角处和墙与地面、墙与吊顶采用圆弧阴阳过渡并封闭，所有配套铝合金型材均采用电泳型材，以防止实验室以后消毒时导致铝材氧化。
  从节能角度考虑实验室系统设计为新风+回风混合系统，采用**送侧下回的气流组织方式。实验室照明均采用洁净室照明灯具，不锈钢斜边型吸顶式带罩密封灯具，镜面全内胆，照明度强，不锈钢边框年久不腐蚀，外形美观，密封好、抗干扰、不积尘、易清洁；实验室消毒采用紫外线灯照射消毒。实验室新风管上均安装电动密闭阀以防止关机时空气回流，并能封闭消毒。万级无菌实验室采用风冷直接膨胀式净化风管型空调机组，满足实验室夏季、冬季冷热负荷，保持实验室恒温恒湿。
  风管在工厂加工完成，可实现角钢法兰的冲孔、下料，圆形风管、矩形风管的制作，三通、弯头、变径等管件的下料加工，效率高，精度好，达到提高了生产效率，减少了现场工人的劳动强度，缩短了工期，降低了对现场环境和噪音的污染。同时，风管洁净度好，降低了清洗的难度。施工完成后需要进行调试及自测工作，其中过滤器安装后的检漏工作非常重要，过滤器在运输和安装过程中可能造成损坏，或者安装不到位都可能造成泄漏，所有安装后需进行在线扫描检测，检测合格后，才能检测房间的洁净度。

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  常用细胞培养器皿有培养瓶,培养板,培养皿等，常准备量是使用量的三倍，器皿应选择透明度好,无毒,利于细胞粘附和生长的材料,常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品。液体储存瓶:用于储存各种配制好的培养液,血清等液体,常用规格有500ml,250ml, 100ml等几种；培养皿:用于开放式培养及其它用途，分直径30mm,60mm,120mm等几种；吸管:常用的有长吸管和短吸管两类,长吸管也称刻度吸管，其改良后管上部有球型刻度称改良吸管,刻度吸管用于移动液体，常用1ml和10ml两种。
  培养瓶:根据培养细胞种类要求不同培养瓶的形态各异,用于细胞传代培养的细胞要求瓶壁厚簿均匀,便于细胞贴壁生长和观察,瓶口要大小一致,口径一般不小于1cm,允许吸管伸入瓶内任何部位,规格有200ml,100ml,50ml,25ml,10ml等几种。离心管:离心管是细胞培养中使用广泛的器皿,根据用途不同形态各样,常用于细胞培养的离心管有大腹式尖底离心管和普通尖底离心管两类。前者分别为50ml,30ml,15ml;后者则多为10ml和5ml。其它:如三角烧瓶,烧杯,量筒,漏斗,器等。
  维持培养细胞旺盛生长,必须有恒定而适宜的温度，不同种类的细胞对培养温度要求也不同，人体细胞培养的标准温度为36.5℃±0.5℃,偏离这一温度范围,细胞的正常代谢会受到影响；培养细胞对低温的耐受力较对高温强,温度上升不**过39℃时,细胞代谢与温度成正比。

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实验室管理使用规程
1目的建立实验室管理使用规程，保证操作者正确使用。
2范围适用于实验室操作。
3责任者操作人员、实验室管理人员。
4内容
4.1实验室应严禁放置杂物,无关人员严禁入内。
4.2实验室应严格保持整洁，防止污染，定期消毒。实验室应每次使用前后用0.1%新洁尔灭溶液擦拭工作台面及可能污染的死角，湿拖地面，每周湿擦墙面及天花板。定期清洁空气净化器，做好消毒记录。无菌衣每周送供应室消毒。
4.3实验人员用肥皂洗手后进入缓冲间换拖鞋，用75%棉球擦手，穿戴工作衣帽、口罩。进行无菌操作时，衣帽穿戴要整洁。帽子要将全部头发遮盖，口罩须遮住口鼻，并修剪指甲，洗手。
4.4将所需物品剥去牛皮纸及外包装，从传递窗移入操作间。所有进出实验室的物品需通过传递窗通道，并且需经过紫外线消毒或75%酒精消毒。
4.5**净工作台使用前开启紫外灯照射30分钟，使用时打开吹风净化工作台，操作完毕及时清理消毒。
4.6取无菌物品时，必须用无菌钳(镊）,镊子剪刀等在每次使用前后，必须通过火焰灭菌冷却后方可使用。未经消毒的物品不可触及无菌物或跨越无菌区。器如需回抽时，应对着火焰吸入无菌空气。
4.7实验过程严格按照无菌操作规程操作，进行无菌操作时如器械、用物疑有污染或已被污染，即不可使用，应更换或重新灭菌。所有消毒火菌物品必须及时标明打开时间，并在规定时限内使用。实验完毕，整理检品及各种用具并清洁工作台面。
4.8细胞培养箱、离心机等实验仪器根据各自要求定期消毒。新配培养液等试剂送检无菌后使用。
4.9各种消毒灭菌剂根据其性能及产品说明与要求配置，并按要求定时测试浓度,保证消毒灭菌效果。实验室定期进行洁净度测试检查沉降菌（在室内打开血琼脂平板30分钟，经37C培养48h),100级平均菌落数不得过1个/皿，如**过应进行清洁消毒。

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