细胞实验室的要求 细胞*学实验室 无尘无菌车间建设方案

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细胞培养室的规划
细胞培养是一种无菌技术，要求工作环境和条件必须保证无微生物和不受其他有害因素的影响。为防止微生物污染和有害因素的影响，细胞培养室要求环境清洁，空气清新、干燥、无尘。
细胞培养实验室由无菌操作区、孵育区、制备区、储藏区、清洗和区6部分组成，这些区域的共同特点是房间要宽敞、明亮，地面要便于清洁、防滑，墙壁的质地光滑坚硬，仪器设备布局合理，方便操作，避免交叉干扰，陈设简洁，便于清扫。
无菌操作区
无菌操作区是只限于细胞培养及其他无菌操作的区域，能与外界隔离，不能穿行或受其他干扰。在一般环境的空气中，由于存在许多尘埃和杂菌，较易造成污染。
理想的无菌操作室应划为三部分：
a) 较衣室：供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。
b) 缓冲间：位于较衣间与操作间之间，用于准备工作，还有防止污染的作用，以保证操作间的无菌环境，同时可放置恒温培养箱以及必需的小型仪器。
c) 无菌操作间：无菌操作间则于无菌操作、细胞培养，其大小要适当，且其**部不宜过高以保证紫外线的效果；墙壁光滑无死角以便清洗和，无菌操作间容积小且为密闭式，一般无菌操作间的空气用紫外线灯，有的实验室使用无臭氧紫外线器或电子器。
净化工作台：操作简单，安装方便，占用空间小且净化效果很好。一般培养室使用的净化工作台主要有两种：a)侧流式或称垂直式 b)外流式或称水平层流式。
孵育区
孵育区也称培养区，本区对无菌的要求虽不比无菌区严格，但仍需清洁无尘，因此也应设置在干扰少而非来往穿行的区域。孵育可在孵箱或可控制温度的温室中进行，后者费用高，一般实验室多采用孵箱进行工作。
制备区
制备区主要进行培养液及有关培养用的液体等的制备。应设有试剂柜、器械柜、实验台和上水道、电源等，配备的主要仪器设备有水纯化装置、天平、微波炉、pH计、抽气泵、电炉、培养分装器、各种规格的培养瓶、培养皿、移液管、烧杯、量筒、容量瓶等。
在有天平、pH计、磁力拌器等设备下完成制备以后，应在无菌操作台进行过滤。液体制备直接关系组织细胞养的成败，因此必须严格无菌操作。
储藏区
储藏区主要存放各类冰箱、干燥箱、液氮罐、无菌培养液、培养瓶等，此环境也需要清洁无尘。为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-196℃。
细胞的冻存过程需要一系列程序降温，一般为4 ℃下存放30min。转放-20 ℃ 1 h，再转入-80—-70℃过夜，之后才可以转移到液氮内(-196℃)。因此储存区必须配备冰箱、低温冰箱、温冰箱和液氮罐等设备。
清洗和区
清洁和区应与其他区域分开，主要进行所有细胞培养器皿的清洗、准备、及三蒸水制备等工作，应备有高压蒸汽锅、过滤设备、电热干燥箱、柜、排风设备等。

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