较大程度避免样本中的损失 北京磁珠法

体液病原DNA提取试剂盒操作简单、快速，所得病原DNA不含蛋白、核酸酶和其他杂质，可直接用于PCR、RT-PCR、 Real-Time PCR 、印迹等分子生物学实验。
体液病原DNA提取试剂盒的操作步骤：
1、取1.5ml离心管(自备)，加入20ul的Proteinase K溶液。
2、向离心管中加入200 ul血清或血浆，然后再加入200 ul BufferGB，涡旋震荡15 sec。
3、56°C孵育15 min，短暂离心，将管壁上的溶液收集到管底。
4、加入250ul无水乙醇，涡旋震荡15sec，室温放置5 min，短暂离心，将管壁上的溶液收集到管底。
5、将一个Spin Columns CG“放入Collection Tubes(2 m1) 中，将上一步所得溶液转移到离心吸附柱中，10 000 rpm离心30 sec，弃收集管中的废液。
6、向吸附柱内加入500ul 的Buffer GD，室温10 000 rpm离心30 sec，弃收集管中废液。
7、向吸附柱内加入500ul的Buffer PW，室温10000rpm 离心30 sec，弃收集管中废液。
8、向吸附柱中加入500ul 无水乙醇，10000 rpm离心30 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
9、室温12000rpm离心3min，甩干残留液体。
10、将离心吸附柱置于一个新的1.5 ml塑料离心管中，小心打开吸附柱的盖子，室温放置3 min,使吸附膜完全变干。加入30~ 100ul的洗脱液，室温放置2~ 5 min。12000 rpm离心1min，离心管底溶液即DNA。

体液病原DNA提取试剂盒的注意事项：
1、血清或血浆避免反复冻融，否则会使蛋白变性或产生沉淀，导致提取的DNA的片段小，提取量下降。
2、如缓冲液Buffer GB、Buffer GD结晶或产生沉淀，可在56"C 水浴溶解。
3、所有离心步骤均为室温下操作。

体液病原DNA提取试剂盒采用结合病毒DNA的离心吸附柱和特有的缓冲液系统，体液病原DNA提取试剂盒适合于从无细胞体液，包括血浆、血清、腹水、培养细胞上清液、脑脊髓液及尿液等中快速提取高纯的DNA。
该产品可以满足绝大多数的DNA提取要求，如DNA：HBV和CMV等。裂解后，DNA后在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除，低盐的洗脱缓冲液将纯净的DNA从硅基质膜上洗脱。纯化后的核酸无杂质和PCR抑制剂，可直接适用于PCR、酶切、杂交等分析。

DNA的分子生物学技术可以用于病源检测、遗传疾病检测、检测、系统进化、物种起源等常用的手段。目前的各种核酸分子生物学技术，包括荧光定量pcr、数字pcr、下一代测序等都获得了大量的进展。但是，这些技术检测结果良好都是以核酸纯化回收效率为前提的。好的DNA纯化技术，应当具备简便、安全、廉价的特点，且回收到的核酸应达到足够的浓度和纯度。

一般来说，核酸分离方法包括酚仿抽提法、冻融法、煮沸法和硅胶膜吸附、磁珠分离等，提取步骤中一般含有细胞裂解、沉淀，离心、漂洗、洗脱、溶解核酸等过程。目前在体液病毒DNA的提取过程中，一般采用硅胶膜吸附或磁珠分离法，经常会用到蛋白酶k加热消化、处理、含醇洗液漂洗、加热洗脱等步骤，操作较为繁琐，现有的一些试剂盒含有具有一些有毒物质，会损害人体健康。另外，受到洗脱液体积的影响，往往难以将回收到的dna全部用于检测，进而影响了检测灵敏度。

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