上述任一所述复合扩增体系还可包括进行pcr扩增反应所需的试剂。所述“进行pcr扩增反应所需的试剂”不包括pcr扩增反应所需的引物。上述任一所述复合扩增体系可为20μl,由10μl2×mastermix,浙江提供迈杰转化医学NGS平台郑重承诺、上述任一所述引物组合和模板组成。2×mastermix具体可为德国qiagen公司的产品。所述模板具体可为浓度为1ng/μl的标准品2800m的水溶液或样品的基因组dna。所述样品可为人口腔拭子。所述标准品2800m具体可为promega公司的产品,产品目录号为dd7251,浙江提供迈杰转化医学NGS平台郑重承诺。含有上述任一所述引物组合的试剂盒也属于本发明的保护范围;所述试剂盒的用途可为(h1)-(h5)中的至少一种:(h1)str分型;(h2)y-str分型;(h3)个体识别;(h4)亲权鉴定;(h5)种族推断。本发明还保护上述任一所述复合扩增体系或上述任一所述试剂盒的制备方法;该制备方法包括将上述任一所述引物组合中的各条引物单独包装的步骤,浙江提供迈杰转化医学NGS平台郑重承诺。本发明还保护上述任一所述引物组合或上述任一所述复合扩增体系在制备试剂盒中的应用;所述试剂盒的用途可为(h1)-(h5)中的至少一种:。 覆盖多个主流IHC自动染色平台,适用范围广。浙江提供迈杰转化医学NGS平台郑重承诺
细胞鉴定:表面标志物鉴定(流式细胞术),分化能力鉴定(间充质干细胞成骨分化、间充质干细胞成脂分化、间充质干细胞成软骨分化),核型分析;细胞转染:慢病毒、腺相关病毒、腺病毒、质粒、microRNA、lncRNA等转染服务;免疫学分析:免疫细胞化学、免疫荧光、激光共聚焦、westernblot、Co-IP、ELISA等;分子技术:qPCR、PCR、***定量PCR等。关键词:人骨髓间充质干细胞、人脐带间充质干细胞、人脐带血间充质干细胞、人羊膜间充质干细胞、人胎盘间充质干细胞、人脂肪间充质干细胞、大鼠骨髓间充质干细胞、大鼠脂肪间充质干细胞、小鼠骨髓间充质干细胞、小鼠脂肪间充质干细胞、兔骨髓间充质干细胞、犬骨髓间充质干细胞、犬脂肪间充质干细胞、猪骨髓间充质干细胞、细胞培养、原代细胞弗元生物,中国自己的生物品牌。河南多组学迈杰转化医学NGS平台创新服务迈杰转化医学拥有专业的病理医生提供相应的阅片或远程病理阅片服务。
h1)str分型;(h2)y-str分型;(h3)个体识别;(h4)亲权鉴定;(h5)种族推断。本发明还保护上述任一所述引物组合或上述任一所述复合扩增体系的应用,可为(h1)-(h5)中的至少一种:(h1)str分型;(h2)y-str分型;(h3)个体识别;(h4)亲权鉴定;(h5)种族推断。上述任一所述68个基因座具体可由amelogenin、dys19、dys385a/b、dyf387s1a/b、dys388、dys389-i、dys389-ii、dys390、dys391、dys392、dys393、dyf399s1、dyf404s1a/b、dys437、dys438、dys439、dys443、dys444、dys446、dys447、dys448、dys449、dys456、dys458、dys459a/b、dys460、dys481、dys485、dys504、dys505、dys508、dys510、dys518、dys520、dys522、dys527a/b、dys531、dys533、dys549、dys552、dys557、dys570、dys576、dys587、dys593、dys596、dys612、dys617、dys622、dys626、dys627、dys630、dys635、dys641、dys643、dys644、dys645、dys710、dys720、y-gata-a10和y-gata-h4组成。其中,amelogenin为性别决定基因座。dyf399s1包含三个分型片段。dys385a/b、dyf387s1a/b、dyf404s1a/b、dys459a/b和dys527a/b均包含两个分型片段。本发明提供的试剂盒可以检测68个基因座。
二代测序是一个强大的功能平台,它可以同时给数以万计的DNA分子进行测序。由于这种可以多个样本同时测序的能力,在个性化医疗、遗传疾病和临床诊断等方面,二代测序也就是高通量测序开创了革命性的领域。早在1900年代就发明的Sanger测序法,成为了DNA测序的黄金法则,即便到了***它仍被***用来进行常规测序和NGS数据的验证。它利用高保真DNA聚合酶生成与单链DNA模版互补的拷贝。在每个反应中,一个可以特异性识别模版的单链引物,可以从3端开始启动DNA合成,根据碱基互补配对原则,脱氧核糖核苷酸或简单的核苷酸是一个接一个的与模版配对。每个反应还包含四种双脱氧核糖核苷酸的混合物,每一种对应一个DNA碱基。这些双脱氧核糖核苷酸与DNA单体十分类似,因此可以参与DNA链的增长,但是他们和天然的脱氧核糖核苷酸有两点不同:(1)他们缺少一个会影响DNA链进一步衍生的3’羟基。在DNA延伸过程中,这个3’羟基一旦加入DNA分子中就会导致链的终止;(2)每个双脱氧核糖核苷酸都有独特的荧光染料吸附,使得DNA测序的自动检测得以进行。 迈杰中心实验室设有SLAN 96P、Rotor-Gene Q、ABI 7500、ABI ViiA7、Roche z480等实时荧光定量PCR仪及数字PCR仪!
thermofisherscientific)等。研究发现,基于pcr-ce分型时,相同片段长度的等位基因中存在重复区域序列结构不一致的情况。二代测序技术(secondgenerationsequencing,sgs)又称为下一代测序技术(nextgenerationsequencing,ngs),具有测序通量高、速度快的优点。ngs不仅能从长度多态性上对str基因座进行分析,还能从序列上发掘str基因座的遗传多态性。随着ngs测序成本越来越低、测序读长逐渐的增加,ngs对str分型技术也越来越成熟。近年来,ngs技术已经应用于法医学str分型研究。相比于pcr-ce分型,ngs技术在y-str基因座的分析中具有很多优势:1、样本输入量低,使得微量样本及降解样本检材的分型研究变为可能;2、准确性高,能够全部覆盖基因座的每个碱基并通过产出高测序深度保证y-str基因座各等位基因的高概率精确判断的严谨性;3、能够获得y-str等位基因间的核苷酸差异信息,由于**重复结构存在差异或扩增区段内存在变异(侧翼序列的碱基突变或插入缺失),序列长度相等的等位基因可能是具有遗传稳定性的完全不同的等位基因,这种y-str序列多态性是个体识别分析的宝贵资源;4、成本低,通过对每个样本检材添加标签一次可以同时对多个样本进行平行测序。 迈杰转化医学同时拥有符合GMP和ISO 13485的要求的GMP生产车间及仓储,可以充分满足客户的需求。山西抗体全迈杰转化医学NGS平台服务至上
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实施例3、实施例1制备的试剂盒的准确性验证1、取1ng标准品2800m、样本一、样本二或样本三(见实施例2中步骤二),按照yfilerpluspcramplifcationkit(thermofisherscientific)的说明书步骤进行毛细管电泳检测,得到各个基因座的等位基因基因型。分型结果见表4。表4注:m为毛细管电泳检测技术的分型结果,e为二代测序技术的分型结果。2、按照实施例2中步骤一的方法检测标准品2800m、样本一、样本二或样本三,得到各个基因座的等位基因基因型。分型结果见表4。结果表明,实施例1制备的试剂盒与yfilerpluspcramplifcationkit重合的基因座,在标准品2800m、样本一、样本二和样本三中的分型结果完全一致。实施例4、实施例1制备的试剂盒中引物具有不可替换性实施例1制备的试剂盒是本发明的发明人经过大量实验获得的,主要包括扩增各个基因座引物的反复调试和引物浓度的摸索。由于复合的基因座数目较多,引物间相互抑制情况复杂,所以试剂盒中用于扩增各个基因座的引物不可替换。1、设计并合成表5中第2列所示的、用于扩增65个str基因座的引物,然后混合,获得引物混合物1。设计并合成表5中第4列所示的、用于扩增66个str基因座的引物,然后混合,获得引物混合物2。 浙江提供迈杰转化医学NGS平台郑重承诺
迈杰转化医学研究(苏州)有限公司是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在江苏省等地区的医药健康中汇聚了大量的人脉以及客户资源,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身不努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是最好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同迈杰转化医学供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长!
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