本发明属于法医学技术领域,具体涉及基于二代测序技术检测68个基因座的试剂盒及其使用的引物组合,尤其涉及基于二代测序技术检测67个y-str基因座和amelogenin基因座的试剂盒及其使用的引物组合。背景技术:短串联重复(shorttandemrepeat,天津定制迈杰转化医学NGS平台共同合作,str)是由2~6bp重复单位串联组成且***存在于人类基因组中的一类具有长度多态性的dna序列,是目前法医个体识别和亲子鉴定应用*****的遗传标记。人类y染色体短串联重复(y-chromosomeshorttandemrepeats,y-str)具有父系遗传、缺乏重组、分型简单、信息量大,天津定制迈杰转化医学NGS平台共同合作、多态性高等特点,是研究人类的起源进化、民族差异、种族差异、群体及地区分布等的有力工具。因此,y染色体str基因座多态性研究可为法医学个体识别和亲权鉴定提供重要手段,在诸如父系家族的亲权鉴定、混合斑男性成分的检测、不同男性个体混合物的分析、追溯父系迁移历史及重构同一父系家族等方向都具有独特的应用价值。目前,荧光标记多重扩增结合毛细管电泳(fluorescentlabeledmultiplexpcr-capillaryelectrophoresis,pcr-ce)是str分型的主流技术;常用的商业化y-str分型试剂盒有y23(promega)、y(promega)、yfiler(thermofisherscientific)和yfilerplus,天津定制迈杰转化医学NGS平台共同合作。迈杰转化医学提供完整的多平台多组学服务,打造流程化yao企业合作。天津定制迈杰转化医学NGS平台共同合作
连接测序法连接测序法与其他两种方法不同,因为他不用DNA聚合酶来结合核苷酸,而是用16种8-merOligo核苷酸探针,在相互连接的5端,每个探针都吸附了四种荧光染料其中的一种。每8-mer包含两个探针特异碱基,和6个退化碱基。测序反应开始时,引物先结合到适配序列上,再和相应探针结合。这个探针的结合时在退火条件下由两个探针特异碱基引导,再由DNA连接酶连接到引物序列上。未结合的oligo核苷酸被洗去后,荧光信号就开始检测会记录。在这之后,切割掉荧光信号和8-mer探针的***3个碱基,就可以开始下一个循环了。在大约7个循环的连接之后,DNA会变性,而另一个测序引物,在前一个引物的下一个碱基后开始重复这些步骤,总共用5个测序引物。这项技术的主要缺点就是产生的测序片段特别短。离子半导体测序离子半导体测序法时在测序反应种通过释放氢离子来检测一个基因蔟的序列。每个基因蔟直接定位在一个半导体三极管上,这个半导体三极管可以检测溶液的ph值。在核苷酸结合过程中,一个氢离子被释放到溶液中并会被半导体三极管检测到。这个测序反应的进行过程和焦磷酸法类似,但是花费只是他的几分之一。 福建多组学迈杰转化医学NGS平台共同合作迈杰转化医学与全球品牌药企广f泛展开伴随诊断产品的开发合作,已有多个诊断产品上市。
GC-MS(气相色谱/质谱联用仪)GC-MS简介GC-MS是气相色谱-质谱联用技术的简称,是将气相色谱仪与质谱仪通过适当接口相结合,借助计算机技术,进行联用的分析技术。GC为气相色谱,流动相为惰性气体,多为氦气,由进样口、色谱柱和检测器三部分构成;MS为质谱,由离子源、滤质器、检测器三部分构成,广泛应用于纯物质鉴定。GC-MS因其具有GC的高分辨率和MS的高灵敏度,被广泛应用于复杂组分的分离与鉴定,是生物样品中药物代谢中定性与定量的主要工具。应用领域代谢组学分析药物分析结构鉴定生物组织蛋白分析物质组分鉴定检测示例技术流程送样须知血清、血浆≥尿液≥动物组织≥250mg样本寄送地址:天津经济技术开发区第十三大街37号逸夫楼225,降老师(收)(具体样本保存与运输条件请与我们联系)我们的优势1、提供各种实验材料和仪器,满足项目课题实验需要。2、专业的操作人员。3、高规格实验室。4、数据结果交付周期快。5、完善的服务体系,全程跟进,确保满意。咨询与订购感谢您选择我们的服务,如果您有任何问题,请联系我们,我们将竭诚为您解答和服务。客服电话:网站:邮箱:market@QQ:一、测序策略:提取样品的基因组DNA,检测基因组DNA的完整性和浓度。
甲基化分析PacBio测序的技术原理可以直接检测到发生甲基化的核苷酸,因此可以在进行其它测序分析的同时完成DNA甲基化的分析。Nanopore技术测序原理将在某一面上含有一对电极的特殊脂质双分子层置于一个微孔之上,该双分子层中含有很多由α溶血素蛋白组成的纳米孔,并且每个纳米孔会结合一个核酸外切酶。当DNA模板进入孔道时,孔道中的核酸外切酶会“抓住”DNA分子,顺序剪切掉穿过纳米孔道的DNA碱基,每一个碱基通过纳米孔时都会产生一个阻断,根据阻断电流的变化就能检测出相应碱基的种类,**终得出DNA分子的序列。Nanopore技术的优缺点Nanopore技术的优点:可以检测结构变异和可变剪切;能直接对RNA分子进行测序;能对修饰过的碱基进行测序;测序读长更长,可以达到150kb;测序数据可以做到实时监控;运行速度快。Nanopore技术的缺点:采用的是水解测序法,不能进行重复测序,因而无法达到一个满意的测序精确度。Nanopore技术的应用基因组组装利用其测序长的特点,可以填补基因组中大片段的gap。临床应用对于临床实践,实时获取和分析DNA/RNA序列是一件很重要的事情,对于传统的高通量测序,做到这一点非常困难,但对于Nanopore技术平台,实现实时获取序列相对容易。 迈杰拥有StarLIMS实验室信息化管理系统,中心实验室获得了中国CNAS ISO 17025实验室认可、美国CAP认证。
02FGFR通路的异常调控FGF/FGFR通路的异常调控由多种因素介导,包括:基因改变(扩增、突变和染色体易位);自分泌和旁分泌信号;血管生成以及上皮间质转化(EMT),进而促进细胞增殖、上皮间质转化和血管生成,并推动**的发***展、侵袭、转移等(图2),其中主要的三种调控途径为:a.FGFR基因扩增导致的蛋白过表达;b.***性突变,该突变通常会导致配体亲和力的提高或受体二聚化的增加及活化(配体不存在的情况下),或激酶结构域的组成性***;c.由染色体易位导致的基因融合。图2FGFR异常调控的致*机制[5]图2FGFR异常调控的致*机制[5]03FGFR异常形式以及在不同**中的分布FGFR常见变异形式包括基因扩增/过表达、***突变、基因融合等,此外还有重排、激酶结构域重复及自分泌***等。FGFR的异常表达已在多种实体瘤肿中检测到,如过表达常发生在肺*、脑*、头颈*、前列腺*等,融合常发生在骨髓增生综合征、T细胞淋巴瘤、膀胱*和肝内胆管*等(表1)。迈杰转化医学围绕生物标志物研究、伴随诊断开发,建立了完善的核酸组学、蛋白组学、细胞组学技术平台。江苏标准迈杰转化医学NGS平台技术指导
【迈杰转化医学】一直以来致力于转化医学服务和伴随诊断产品开发及商业化。天津定制迈杰转化医学NGS平台共同合作
实施例3、实施例1制备的试剂盒的准确性验证1、取1ng标准品2800m、样本一、样本二或样本三(见实施例2中步骤二),按照yfilerpluspcramplifcationkit(thermofisherscientific)的说明书步骤进行毛细管电泳检测,得到各个基因座的等位基因基因型。分型结果见表4。表4注:m为毛细管电泳检测技术的分型结果,e为二代测序技术的分型结果。2、按照实施例2中步骤一的方法检测标准品2800m、样本一、样本二或样本三,得到各个基因座的等位基因基因型。分型结果见表4。结果表明,实施例1制备的试剂盒与yfilerpluspcramplifcationkit重合的基因座,在标准品2800m、样本一、样本二和样本三中的分型结果完全一致。实施例4、实施例1制备的试剂盒中引物具有不可替换性实施例1制备的试剂盒是本发明的发明人经过大量实验获得的,主要包括扩增各个基因座引物的反复调试和引物浓度的摸索。由于复合的基因座数目较多,引物间相互抑制情况复杂,所以试剂盒中用于扩增各个基因座的引物不可替换。1、设计并合成表5中第2列所示的、用于扩增65个str基因座的引物,然后混合,获得引物混合物1。设计并合成表5中第4列所示的、用于扩增66个str基因座的引物,然后混合,获得引物混合物2。 天津定制迈杰转化医学NGS平台共同合作
迈杰转化医学研究(苏州)有限公司是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在江苏省等地区的医药健康中汇聚了大量的人脉以及客户资源,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身不努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是最好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同迈杰转化医学供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长!
迈杰转化医学研究(苏州)有限公司是一个基于转化医学为医疗提供完整解决方案的创新型公司,凭借生物科技技术和设施以及强大的团队,为我们的合作伙伴提供从生物标志物的研发、到伴随诊断和即时诊断产品的研发、并一直到临床检测及商业化的一站式服务。