样本制备时间少 上海游离DNA 提取过程简便

血浆病原DNA提取试剂盒提取的核酸纯度高。核酸纯度一般根据OD260/OD280比值来判断。一般说来，试剂盒提取的DNA其OD260/OD280比值应在1.6--1.8之间。
血浆病原DNA提取试剂盒的操作步骤：
1、取出洗涤液，按以下操作：
洗涤液A：21mL加入9mL无水乙醇；42mL加入18mL无水乙醇，混匀。
洗涤液B：9mL加入21mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇，混匀。
配制好的洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。
2、取1.5mL离心管，加入200μL血液样本，再加入200μL 裂解液及40μL 消化液，振荡混匀，65℃水浴10 分钟。
3、加入150μL异丙醇（总体积的25%），混合均匀，如有半透明悬浮物，不影响DNA的提取与后续实验。
4、将吸附柱放入收集管内，将上述溶液转入吸附柱内，12,000 rpm 离心1 分钟，弃收集管内废液；
5、将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液A至吸附柱内，12,000 rpm 离心1 分钟，弃收集管内废液。
6、将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液B至吸附柱内，12,000 rpm 离心1 分钟，弃收集管内废液。
7、按每份样本40μL 取洗脱液，放置于灭菌1.5mL离心管，65℃预热。
8、将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 离心2 分钟，离去残留的洗涤液。
9、取出吸附柱，放入新的1.5 mL 灭菌离心管内，在吸附柱中心加入40 μL 预热洗脱液，静置2分钟，12,000 rpm 离心1分钟，收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。

一般来说，血清血浆的量与提取的核酸量成正比。因而，如果要提高核酸得率，可通过增加血清或血浆的量来实现。一般地，做血浆或血清核酸提取，样本量在1ml以上。如果1ml或较大量样本得不到满意的检测结果，则应及时考虑更换提取试剂盒。血浆病原DNA提取试剂盒的核酸提**率较高，1ml病人血浆样本DNA得率在85ng左右，Q的得率在72ng左右，T的得率在63ng左右，基本上都能满足下游PCR实验的需求。其检测下限为2ng/ul。如洗脱液为30ul，则需要1ml左右的血浆才能检测出来。显然，如果是健康人的血浆，1ml血浆的DNA浓度较低。因而，血浆DNA提取完成以后，应该直接做PCR。

血浆病原DNA提取试剂盒中时间成本、生产率的考虑：
当一次处理**过50个样本时，不再考虑使用小量柱纯化，高通量DNA提取试剂盒是较好的选择，它可以以96孔的形式运行，以便在需要同时处理多个样本的DNA的实验。
DNA提取试剂盒有各种规格和大小，然而，共同的主线是，所选择的试剂盒能产生干净和浓缩的DNA。可以定期评估DNA提取物的数量和质量，以确保试剂盒适合此应用类型。

在选择DNA提取试剂盒时，较重要的变量可能是你所使用的生物体。
1、许多试剂盒都有用于DNA分离的不同成分，这些试剂盒之间的主要区别在于细胞是如何被分解的，因为有些比其他较较有挑战性。例如，形成生物膜的可能比传统的基于去垢剂的方法需要较强的裂解技术。
2、动物组织：用于动物组织DNA分离的试剂盒通常具有较温和的裂解技术，因为大多数动物细胞不像细胞那样有细胞壁。然而，动物组织DNA提取的挑战往往在于选择合适的组织匀浆方法。此外，许多动物DNA纯化试剂盒不使用/氯仿萃取或乙醇作为沉淀步骤，以减少破坏DNA的风险。
3、植物：当涉及到植物DNA分离时，必须考虑到其他一些因素，需要注意污染物的去除。植物在纯化过程中通常含有未分离的糖，因此，洗涤剂选择性地与DNA结合并从溶液中析出，通常是先将洗涤剂溶解在高浓度的盐溶液中，然后提取DNA。
4、血液：由于技术上的许多新进展，血液DNA分离试剂盒中有多种裂解技术和提取方法可供选择。从血液中分离出的DNA将在很大程度上决定你使用的裂解和提取的类型。无论应用是什么，一定要选择一种能够提供纯净、完整、双链和浓缩DNA的试剂盒，以获得较好地效果。

一般来说，质粒DNA分离要比基因组DNA分离温和。这是因为针对质粒DNA的裂解步骤需要染色体DNA与细胞蛋白片段保持结合，以防止其污染终的样品。两种类型的DNA回收都有试剂盒，甚至有可以同时纯化基因组DNA和总RNA的试剂盒。
当使用血浆病原DNA提取试剂盒分离不同血液体积样本时，能表现得较好，在于提取较高的DNA产量和纯度。

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