自动化提取 广州FFPE核酸提取试剂盒

福尔马林固定石蜡包埋技术（Formalin-Fixed and Parrffin-Embedded, FFPE）是一种组织保存技术。这种技术为了维持细胞核的蛋白结构，先用福尔马林固定然后将组织用固体石蜡包埋，以供切片后作组织学诊断或研究使用。
FFPE样本DNA提取试剂盒中常用的法脱蜡法的过程和问题：
目前应用在成熟试剂盒中的脱蜡方法主要是溶剂脱蜡法，其中脱蜡法由于其脱蜡彻底的特性，较广泛的应用在疾病研究中。
在脱蜡法中，需要将石蜡包埋组织浸泡在溶液中进行脱蜡，后面经过两次高温处理，每次各一个小时，分别在56℃和90℃。在此期间结合消化缓冲液和蛋白酶K来消化组织，同时利用梯度乙醇来疏松组织结构、促进消化液渗入并去除组织中痕量。

FFPE样本DNA提取试剂盒使用中为什么要脱蜡？
如果要对FFPE组织进行分子生物学研究，开始的就是要进行DNA的提取。 但是固定剂的交联作用对核酸是有害的，福尔马林石蜡和交联作用会妨碍核酸的提取，抑制DNA聚合酶的活性从而影响PCR扩增。除此之外，石蜡阻碍消化液对组织的渗透，从而抑制蛋白酶K和组织内蛋白的接触，影响组织消化和DNA释放。所以为了消除石蜡对DNA提取和PCR扩增的不良影响，必须在保证不增加外源性PCR抑制因子，并尽量减少DNA额外损伤的前提下对组织进行彻底脱蜡。

福尔马林固定石蜡包埋( Formalin Fixed andParaffin Embedde, FFPE)成为病理学、法医病理学等进行样本保存的主要手段。对组织样本进行FFPE的保存，有助于研究人员较加深入地了解经多年保存后的病理标本中所包含的遗传机制和病理成因。目前，**约有2-4亿FFPE组织样本，这些组织样本已经是疾病诊断和科学研究宝贵的的生物学资源之一。

FFPE样本DNA提取试剂盒的应用步骤：
1、从源头抓起，完善样本的前处理
离体时间：取材后应在30min内及时固定，防止组织变质。
样本要求：选择合适大小的组织块制作石蜡包埋组织样本，一般不**过15x10x5mm。
固定液选择：建议使用10%中性福尔马林固定液，对组织进行固定，固定液应为被固定标本体积的5-10倍，并定期更换。
固定时间：根据样本情况调节固定时间，一般在24-48h为宜，固定时间过长会加重FFPEDNA的片段化。
包埋要求：选用纯净且熔点适宜的蜡，包埋要迅速，禁用明火。
切片厚度：包埋好的组织样本根据需要确定切片厚度，标准切片厚度为4um，用于核酸提取的切片可以在10-20um，保证切片厚度的持续稳定。
2、选择合适的提取试剂盒
目前市场上有多种提取试剂盒，应选择合适的试剂盒才能保证实验的成功率。

FFPE样本DNA提取试剂盒提供了一种快速提纯方法，可在短短时间内从福尔马林固定的FFPE组织样品中分离和纯化总RNA。由于使用福尔马林固定组织导致RNA和蛋白质的交联，并且嵌入组织样品的过程也可导致RNA随时间的破碎。FFPE样本DNA提取试剂盒允许逆转部分福尔马林的修饰，从而获得高质量和高产量的RNA。该试剂盒能够净化所有大小的RNA，从大的mRNA和核糖体RNA到microRNA和小干扰RNA，取决于FFPE组织的年限，因为已知RNA的碎片化会随着时间的推移而发生。
储存条件：
磁珠悬浮液和蛋白酶K置于2-8℃保存，其他试剂可室温保存，有效期12个月。

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