DNA分选纯化试剂盒能从不同类型的水样中发现的所有微生物中分离总DNA和RNA,包括菌类和藻类,使用相同的柱子同时对RNA和DNA进行柱纯化。
DNA分选纯化试剂盒主要是利用交换吸附材料吸附核酸,从而将核酸和蛋白质等其细胞中其他物质分离。
DNA分选纯化试剂盒采用了纳米级磁珠微珠,这种磁珠微珠的表面标记了一种官能团,能同核酸发生吸附反应。硅磁就是指磁珠微珠表面包裹一层硅材料,来吸附核酸,其纯化原理类型于玻璃奶的纯化方式。
离心磁珠是指磁珠微珠表面包裹了一层可发生离心交换的材料等,从而达到吸附核酸目的。不同性质的磁珠微珠所对应的纯化原理是不一致。使用磁珠法来纯化核酸的优点就是自动化。磁珠在磁场条件下可以发生聚集或分散,从而可彻底摆脱离心等所需的手工操作流程。
DNA分选纯化试剂盒的主要特点是既可以分散于液体中,也可以在外加磁场作用下以固态方式和液相分离,任何试剂体系,磁珠和液体的比例都应该是有一定阈值的,**过一定的比例,过多的磁珠将因为无法均匀分散于液体中,而丧失其分散的特性,也使得洗涤过程中无法充分增加核酸磁珠和液体接触的效率。
而过量的磁珠也会吸附更多的杂质,对于除杂的效果影响非常大。甚至有些时候,过多的磁珠会吸附蛋白酶、溶菌酶等在液体体系中起主要作用的功能成分,导致整个试剂盒效率低下。有很多时候,在提取效果不佳的时候,减少磁珠使用量,反而是提升提取效果的较好途径。
DNA分选纯化试剂盒(磁珠法)试剂储藏条件为2-8℃保存,有效期12个月。使用特别的离心吸附柱效率高地与DNA的片段结合,同时能较大限度除去蛋白质、离子及引物小片段等杂质。除了可用于PCR产物回收,对于一些酶反应液回收(酶切、连接、探针标记等)也同样适用。可回收100 bp-20 kb,DNA的片段,回收率可高达80%以上(<100 bp或>10 kbDNA的片段,回收率为30%-50%)。得到的DNA可直接用于连接、转化、酶切、测序、杂交等分子生物学实验。
DNA分选纯化试剂盒的产品特点:
1、速度快。
15 min完成DNA回收,可同时处理多个样品,节省时间。
2、步骤少。
操作简单,几次离心即可完成。
3、效率高。
特别的离心柱和精心配制的缓冲液保证每次能大量回收。
4、纯度很高的目的DNA。
5、处理量大。
每个离心吸附柱每次至多可吸附的DNA量为10μg。
提**到的核酸杂质过多时,使用者会考虑多进行几次洗涤,以得到较为纯净的核酸。增加洗涤次数确实有利于提纯核酸,但考虑到每次洗涤都会损失一定量的核酸,且增加了核酸断裂水解的可能性,所以一般来说洗涤次数控制在2~4次为宜。
DNA分选纯化试剂盒,单一纯化类试剂盒的洗涤次数为2次,植物、动物类试剂盒的洗涤次数为3次,血液类试剂盒洗涤次数为3~4次。
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