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  • 2022-07-06 05:09 73
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        发明人还提供上述任一所述的抗msh6蛋白单克隆抗体,在msh6蛋白免疫检测中的用途。进一步地,所述免疫检测包括免疫组织化学法,免疫印迹法和酶联免疫法。区别于现有技术,上述技术方案依据msh6蛋白、抗原性、组成氨基酸的亲疏水性以及二级结构,选择msh6蛋白第1-100位氨基酸序列与gst蛋白融合表达,其dna编码序列为seqid**,用大肠杆菌进行表达,得到免疫原。对小鼠进行免疫,经细胞融合、筛选和亚克隆,获得高效分泌抗msh6蛋白单克隆抗体的单克隆细胞系abm58060-20a2-pu,以及由该细胞系所分泌的抗msh6蛋白单克隆抗体,浙江推荐dMMR抗体检测试剂创新服务。本方案得到的抗体具有高特异性,浙江推荐dMMR抗体检测试剂创新服务、敏感性,可以特异性识别表达msh6蛋白的细胞,适用于免疫学检测,特别是免疫组化检测。化染色结果图(左为abm58060-20a2-pu分泌的msh6,右为市售msh6)。具体实施方式实施例1重组msh6蛋白片段的制备一、抗原片段选择依据uniprot中登录号为p52701的蛋白质序列进行序列和二级结构分析,全长为1360个氨基酸长度的msh6蛋白含有muts超家族区域,其分子量约为152kda左右,依据通过在线服务器测的蛋白的二级结构(secondarystructure)和表面可及性(surfaceaccessibility)参数,并通过对其抗原性指数(jamesonba,:(1):181-6.)的分析结果,浙江推荐dMMR抗体检测试剂创新服务。迈杰基于基因组学、蛋白组学、细胞组学及病理组学等综合性转化医学平台,丰富的伴随诊断开发经验。浙江推荐dMMR抗体检测试剂创新服务

        MMR)突变而易患结直肠ai和其他恶性liu的一种常染色体显性遗传性疾病,占结直肠ai的2%~5%。该综合征曾被命名为遗传性非腺瘤性结直肠ai(HNPCC),后因该命忽略了肠外liu的高发率而弃用。已知MLH1、MSH2、MSH6和PMS2这四种MMR基因与林奇综合征的发生密切相关。大多数林奇综合征家(85%~90%)检测到的是MLH1和MSH2突变,剩余的10%~15%的家族存在MSH6的突变,少数存在PMS2的突变[7]。同时,已有研究表明:绝大多数林奇综合征都具有高水平微卫星不稳定性(MSI-H)的现象[8]。林奇综合征发病年龄较早,平均年龄为45岁,明显低于正常人群发生结直肠ai的平均年龄(60岁)。林奇综合征患者的结肠ai好发于近端结肠,70%~85%的liu位于结肠脾区附近。这些liu具有特异的组织病理学特征,比如髓样生长的ai、粘液腺ai或liu区过多的淋巴细胞浸润。林奇综合征患者在其一生中易发生多处原发liu,据统计有54%~61%的林奇综合征患者会发生第二种原发liu,更有甚者,部分患者会发生三种或更多的原发liu[7]。这些liu包括有子宫内膜ai、胃ai、卵巢ai、尿路liu、肝胆liu、胰腺ai等。因此,当确诊的林奇综合征患者在发现***处结直肠ai时就会被建议进行更大的结肠次全切除术或全切术。江西推荐dMMR抗体检测试剂服务至上迈杰转化医学可以提供覆盖肺ai、肠ai、肝ai、胃ai、乳腺ai、前列腺ai等多种实体瘤的上百项检测项目。

        3)当样本为MSH6或PMS2蛋白缺失的MSI-L时,可能是Lynch综合征的罕见表型,建议进一步确诊。由于所有MMR蛋白的核染容易识别,且周围间质组织就可作为内对照;同时IHC检测具有操作简单、价格便宜和可以迅速拿到检测结果等优点,所以目前IHC检测已经替代PCR检测成为林奇综合征的初步筛选方法,或在PCR检测之后找出缺失的MMR蛋白。MSI对结直肠ai化疗和预后的预测意义结直肠ai的化疗而言,有大量的研究表明MSI状态对于决定结直肠ai患者是使用5-FU***还是伊立替康***很重要。一项林奇综合征患者长期随访的回顾性研究,根据MSI状态进行评价,证实5-FU辅助***可使MSI-L和MSS患者生存得到改善。然而,在MSI-H患者术后5-FU辅助***并没有显示出有统计学意义的效果,相反5年生存率低于那些*接受手术***的患者[11]。同时,MSI患者比起MSS患者对伊立替康的***更为敏感。根据上文所述,MSI的发生,与MMR基因缺失有关,因此NCCN结直肠ai小组建议计划单独使用5-FU进行辅助***的Ⅱ期结直肠ai患者需进行MSI检测。结直肠ai的预后而言,一项汇集32项研究的荟萃分析表明:MSI患者生存期更长、病死率更低(不易发生liu复发及淋巴结转移)[12]。鉴于MMR基因在结直肠ai***和预后方面的***影响。

        免疫组化从理论上讲也是组织细胞中抗原的特定显示,如角蛋白(keratin)显示上皮成分,LCA显示淋巴细胞成分。只有当组织细胞中存在交叉抗原时才会出现交叉反应。2、敏感性高在应用免疫组化的起始阶段,由于技术上的限制,只有直接法、间接法等敏感性不高的技术,那时的抗体只能稀释几倍、几十倍;现在由于ABC法或SP法的出现,使抗体稀释上千倍、上万倍甚至上亿倍仍可在组织细胞中与抗原结合,这样高敏感性的抗体抗原反应,使免疫组化方法越来越方便地应用于常规病理诊断工作。3、定位准确、形态与功能相结合该技术通过抗原抗体反应及呈色反应,可在组织和细胞中进行抗原的准确定位,因而可同时对不同抗原在同一组织或细胞中进行定位观察,这样就可以进行形态与功能相结合的研究,对病理学研究的深入是十分有意义的。迈杰转化医学分子平台可以基于成熟的qPCR技术定量检测外源载体拷贝数,应用于药物分布实验如CAR-T等。

        MSI属于一种基因水平的变异现象,而背后的根源则是错配修复蛋白功能缺失。故无论从蛋白水平检测MLH1、MSH2、MSH6、PMS2等分子,还是在基因水平检测MSI状态均有助于判断该类病因。现已证明二者的符合性达到。然而由于人们首先在结直肠ai中认识了微卫星不稳定现象,并且将结直肠ai被分为MSI-H(MSI高度不稳定)型和MSS(微卫星稳定型)以区别其在预后与***方面的差异。早期的检测方法为通过对Bat26、Bat25、D5S346、D2S123和D17S250五个微卫星位点的检测,根据其存在MSI的数量将结直肠ai分为MSI-H(具有两个和两个以上的位点改变)、MSI-L(只有一个位点发生改变)和微卫星稳定型(MSS)。MSI-L型在临床表现上与MSS**无明显差别,通常被归为MSS**。随后当人们认识到为星星不稳定现象源于错配修复系统功能缺陷,并且对其机制研究透彻之后逐渐形成通过对错配修复蛋白的检测来确定MSI的方法,即错配修复蛋白免疫组织化学检测。免疫组织化学的方法具有方便、快捷、稳定等优点并且对Lynch综合征的确诊具有指向性,因此被***接收,目前已几乎替代前者。上述MSI的传统检测方法不能用于对Lynch综合征的确诊,而免疫组织化学方法因直接检测相关蛋白对Lynch综合征具有***的指向性。迈杰转化医学与全球品牌药企广f泛展开伴随诊断产品的开发合作,已有多个诊断产品上市。江西推荐dMMR抗体检测试剂服务至上

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    单位注册资金:人民币 300 万元 - 500 万元。
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