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    发明人还提供上述任一所述的抗msh6蛋白单克隆抗体，在msh6蛋白免疫检测中的用途。进一步地，所述免疫检测包括免疫组织化学法，免疫印迹法和酶联免疫法。区别于现有技术，上述技术方案依据msh6蛋白、抗原性、组成氨基酸的亲疏水性以及二级结构，选择msh6蛋白第1-100位氨基酸序列与gst蛋白融合表达,其dna编码序列为seqid**，吉林专注dMMR抗体检测试剂技术指导,用大肠杆菌进行表达，得到免疫原。对小鼠进行免疫，经细胞融合、筛选和亚克隆，获得高效分泌抗msh6蛋白单克隆抗体的单克隆细胞系abm58060-20a2-pu,以及由该细胞系所分泌的抗msh6蛋白单克隆抗体。本方案得到的抗体具有高特异性、敏感性，可以特异性识别表达msh6蛋白的细胞，适用于免疫学检测，特别是免疫组化检测。化染色结果图(左为abm58060-20a2-pu分泌的msh6，右为市售msh6)。具体实施方式实施例1重组msh6蛋白片段的制备一、抗原片段选择依据uniprot中登录号为p52701的蛋白质序列进行序列和二级结构分析，全长为1360个氨基酸长度的msh6蛋白含有muts超家族区域，其分子量约为152kda左右，吉林专注dMMR抗体检测试剂技术指导，依据通过在线服务器测的蛋白的二级结构(secondarystructure)和表面可及性(surfaceaccessibility)参数，并通过对其抗原性指数(jamesonba,:(1):181-6.)的分析结果，吉林专注dMMR抗体检测试剂技术指导。迈杰转化医学与全球品牌药企广f泛展开伴随诊断产品的开发合作，已有多个诊断产品上市。吉林专注dMMR抗体检测试剂技术指导

    MMR）突变而易患结直肠ai和其他恶性liu的一种常染色体显性遗传性疾病，占结直肠ai的2%~5%。该综合征曾被命名为遗传性非腺瘤性结直肠ai（HNPCC），后因该命忽略了肠外liu的高发率而弃用。已知MLH1、MSH2、MSH6和PMS2这四种MMR基因与林奇综合征的发生密切相关。大多数林奇综合征家（85%~90%）检测到的是MLH1和MSH2突变，剩余的10%~15%的家族存在MSH6的突变，少数存在PMS2的突变[7]。同时，已有研究表明：绝大多数林奇综合征都具有高水平微卫星不稳定性（MSI-H）的现象[8]。林奇综合征发病年龄较早，平均年龄为45岁，明显低于正常人群发生结直肠ai的平均年龄（60岁）。林奇综合征患者的结肠ai好发于近端结肠，70%～85%的liu位于结肠脾区附近。这些liu具有特异的组织病理学特征，比如髓样生长的ai、粘液腺ai或liu区过多的淋巴细胞浸润。林奇综合征患者在其一生中易发生多处原发liu，据统计有54%～61%的林奇综合征患者会发生第二种原发liu，更有甚者，部分患者会发生三种或更多的原发liu[7]。这些liu包括有子宫内膜ai、胃ai、卵巢ai、尿路liu、肝胆liu、胰腺ai等。因此，当确诊的林奇综合征患者在发现***处结直肠ai时就会被建议进行更大的结肠次全切除术或全切术。四川提供dMMR抗体检测试剂口碑推荐迈杰转化医学可以提供覆盖肺ai、肠ai、肝ai、胃ai、乳腺ai、前列腺ai等多种实体瘤的上百项检测项目。

    与无突变的结直肠ai相比，BRAF突变型CRC患者的年龄偏大，女性居多，微卫星不稳定可能性大、组织级别高，淋巴结转移率和局部晚期发生率高。术后辅助***后，BRAF突变型CRC的无病生存期更短，复发后的总生存期更差。PETACC-3研究检测了1404例Ⅱ~Ⅲ期结肠ai患者的BRAF和KRAS突变，结果显示，BRAF突变型患者的总生存劣于野生型患者。当根据微卫星不稳定分层后，这种差异更加明显。PETACC8和N0147试验的汇总分析提示WT组，BRAF突变组的中位SAR分别为，和，其中BRAF突变组（HR：：，P＜），提示BRAFV600E是TTR，SAR和OS的**预测因子。在以后的临床试验辅助试验中应将这些突变纳入为重要分层因素。2.评估Lynch综合症Lynch综合症的机制通常是胚系MMR的缺失，SepulvedaAR等报道BRAFV600突变在胚系MMR缺失的患者中很少发生，但在具有表现得MMR缺失患者中被报道有高达3/4的患者具有BRAFV600E突变。因此BRAF突变可作为区分胚系与表现dMMR的手段，特别是MLH1缺失的情况下，进一步评估Lynch综合症。三、MSI/MMR大量研究表明，微卫星不稳定（MSI）是由错配修复（MMR）基因发生缺陷引起的，当错配修复系统功能异常时，微卫星出现的复制错误得不到纠正并不断累积。

    当liu细胞出现一种或几种错配修复蛋白核表达的丢失，则提示liu为MSI-H。MLH1和MSH2作为错配修复复合体的共用亚单位，在发生功能缺陷时常同时伴有其同源错配修复蛋白的表达缺失。另外，如前所述，部分Lynch综合征是由于EpCAM基因胚系突变导致下游MSH2基因功能缺陷所致。Musulen等发现，在MSH2表达缺失的liu中检测出EpCAM蛋白缺失，与EpCAM基因突变的吻合率达100％，所以推荐将EpCAM免疫组织化学检测加入到Lynch综合征的筛查流程中。日常工作中用于鉴别肺腺ai与恶性间皮瘤的抗体Ber-EP4即是检测EpCAM的常用克隆之一。免疫组织化学检查错配修复蛋白表达缺失的作用如下：(1)提示哪个错配修复基因发生了功能缺失(表1)；(2)与MLH1启动子甲基化检测和／或BRAFV600E突变检测结合，区分散发性MSI-H结直肠ai和可疑Lynch综合征患者；(3)与EpCAM免疫组织化学检查结合，为后续的Lynch综合征遗传学突变检测提示方向。目前，4种主要的错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2均已有稳定的商品化抗体，但受组织固定、染色条件、抗体克隆号不同等因素的影响，可能会出现假阳性或假阴性结果。在判读免疫组织化学染色结果时应注意：(1)内对照是否阳性；(2)着色部位是否为细胞核；。迈杰转化医学拥有3D HISTECH Pannoramic MIDI数字化病理扫描仪及91360远程病理系统。

    3）当样本为MSH6或PMS2蛋白缺失的MSI-L时，可能是Lynch综合征的罕见表型，建议进一步确诊。由于所有MMR蛋白的核染容易识别，且周围间质组织就可作为内对照；同时IHC检测具有操作简单、价格便宜和可以迅速拿到检测结果等优点，所以目前IHC检测已经替代PCR检测成为林奇综合征的初步筛选方法，或在PCR检测之后找出缺失的MMR蛋白。MSI对结直肠ai化疗和预后的预测意义结直肠ai的化疗而言，有大量的研究表明MSI状态对于决定结直肠ai患者是使用5-FU***还是伊立替康***很重要。一项林奇综合征患者长期随访的回顾性研究，根据MSI状态进行评价，证实5-FU辅助***可使MSI-L和MSS患者生存得到改善。然而，在MSI-H患者术后5-FU辅助***并没有显示出有统计学意义的效果，相反5年生存率低于那些*接受手术***的患者[11]。同时，MSI患者比起MSS患者对伊立替康的***更为敏感。根据上文所述，MSI的发生，与MMR基因缺失有关，因此NCCN结直肠ai小组建议计划单独使用5-FU进行辅助***的Ⅱ期结直肠ai患者需进行MSI检测。结直肠ai的预后而言，一项汇集32项研究的荟萃分析表明：MSI患者生存期更长、病死率更低(不易发生liu复发及淋巴结转移)[12]。鉴于MMR基因在结直肠ai***和预后方面的***影响。迈杰转化医学致力于解决创新药物的研发痛点及患者的用药痛点，助力精z准医疗！吉林专注dMMR抗体检测试剂技术指导

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    MSH2和MLH1分别与其同源错配修复蛋白组成复合体发挥作用。MSH2分别与MSH6、MSH3组成复合体MutSα、MutSβ。MLH1则分别与PMS2、PMS1或MLH3形成复合体MutLα、MutLβ或MutLγ。MutSα或MutSβ识别了错配碱基后，与DNA碱基结合，再与MutL结合，***ATP酶，水解错配的碱基，同时***核酸内切酶1，切除并修复错配的碱基。微卫星(microsatellite)***存在于原核及真核生物基因组中，具有较高的遗传稳定性，但在错配修复基因功能发生异常时，子代细胞微卫星的重复核苷酸数量可增多或减少，导致微卫星的长度不再保持一致，这种现象称MSI。错配修复基因发生突变或启动子甲基化可引起DNA错配修复功能的降低，导致MSI。很多重要的生长调节相关基因如Ⅱ型TGF-β、IGF2R、PTEN、BAX等的编码区或启动子区含有微卫星，错配修复异常导致的MSI可引起这些基因在复制过程中发生错义突变或移码突变，这种复制错误不断累积，**终造成liu的发生，而MSI则可作为经此途径发生的结直肠ai的分子标志物。人类基因组中的微卫星位点很多，1998年MSI国际研究合作组织推荐对Bat26、Bat25、D5S346、D2S123和D17S250五个位点进行检测，根据微卫星位点不稳定的数量将结直肠ai分为高频MSI(MSI-H。吉林专注dMMR抗体检测试剂技术指导

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