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    但大多数情况下膜蛋白胞外区由于高级结构的存在，该方法很难获得抗天然蛋白的高亲和力的抗体。有文献采用该方法与DNA疫苗或RNA疫苗联合使用，可以获得较好的免疫效果，但抗体筛选依然需要天然结构的抗原。图四：HBcAg嵌合VLP抗原CancerRes;71(2)January15,2011嵌合VLP展示可以较好的维持很多膜蛋白胞外区结构，但框架区域较大，免疫时大量产生抗HBV抗体；同时该结构的蛋白在做抗体筛选时特异性低，筛选效率较低。图五：膜蛋白模拟蛋白A）；B）用结构相似的水溶性Helix替代跨膜区，获得维持胞外区基本构象的水溶性膜蛋白模拟蛋白（）跨膜区替换膜蛋白模拟蛋白需要对原有膜蛋白结构有较好的信息，才能挑选合适的水溶性框架，如我们采用Claudin19为模板对Claudin18跨膜区进行预测。该模拟蛋白在免疫动物时可能产生部分抗框架抗体，更适用于抗体筛选时使用。近岸蛋白质提供相同框架的（.CR54）进行负筛可以获得较好的筛选效果。图六：xECDzipper：利用蛋白拉链使多次跨膜蛋白胞外区基本维持膜蛋白天然构象（）xECDzipper结构能够维持大多数膜蛋白胞外区结构，同时外源氨基酸较少，结构简洁，适合动物免疫与抗体筛选。近岸蛋白质推荐的：图七：采用阳性抗体对：图八：Claudin。

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    TBST室温洗膜3次，加入兔抗山羊IgG-HRP二抗(中杉公司)，37'C孵育1h，TBST室温洗膜3次，再用TBS洗3次，NC膜浸入OPD显色液中，室温避光显色10min，蒸馏水冲洗终止反应。抑瘤实验每周观察小鼠体内抗体滴度变化，待观察到形成**组织块后隔天检测**体积和小鼠体重。小鼠死亡时取出**组织称重，计算抑瘤率。全文摘要本发明属于医药生物技术领域，具体涉及一种重组人**疫苗及其制备方法。本发明要克服胃*、胰腺*、食道*以及转移和未转移卵巢*免疫***中手术切除复发率高、化疗和放疗毒副作用强以及单抗***费用高等问题。所采用的技术方案是一种重组人**疫苗，其序列为HMKSSQYIKANSKFIGEFDQWSTQDLYNNPVTAVFNYQGLWRSCVRESSGFTECRGYFTLLGLPAMLQAV。通过动物实验证实∶10000以上；该抗体可以与人KATOIII和PANC-1**细胞以及小鼠胃*MFC和胰腺*MPC-83细胞相结合；该蛋白作为**疫苗可抑制小鼠体内胃*MFC和胰腺*MPC-83细胞的生长。文档编号C12N15/70GKSQ8公开日2009年11月25日申请日期2009年4月27日优先权日2009年4月27日公开号8.发明者镭刘。迈杰转化医学具体包括全套的Leica组织样本制备系统，Ventana、Leica、DAKO等全自动免疫组化仪。吉林多靶点Claudin18.2抗体检测试剂服务至上

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    原发性胃腺*组织中存在达，极为重要的是其中56%的组织表达量达到60%以上。与上述研究结果一致的是肠型胃*中，而弥散型胃*中的表达较高。但是，胰腺、食道、卵巢等组织在正常状态下没有白表达，而相应的**组织中可以大量表达。所以，蛋白可以作为临床**诊断和***的耙位。但，目前尚未见以该蛋白为靶位研制的**疫苗。3、***性疫苗研究进展近年来，针对人类自身蛋白的单克隆抗体在***急、慢性疾病的过程中显示出了良好的效果。但是，造价的昂贵和使用上的不便限制了单克隆抗体的广泛应用，因此，由被动地接受这种抗体蛋白转向寻求针对人类自身蛋白的主动免疫疫苗，既用主动免疫的***方式替代被动免疫，成为蛋白药物的发展方向。目前，***性疫苗的研究已成为一个热点，涉及很多疾病，如慢性病毒***、过敏、**、阿尔海默茨病、糖尿病、***、肥胖症以及风湿性关节炎等。***性疫苗使人的免疫系统发生有利于患者的反应。大部分的疫苗可以分为两大类一类是诱导机体发生体液免疫反应，产生抗体；另一类是诱导机体发生细胞免疫反应，产生细胞毒性T细胞(CTLs)。后一类***性疫苗主要用于**和病毒***性疾病的***。绝大多数的预防性疫苗都是通过诱导抗体的产生来保护机体的。吉林多靶点Claudin18.2抗体检测试剂服务至上

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