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    目前***使用的用于蛋白质鉴定的质谱分析主要使用两种类型质谱：一种是MALDI-TOF直接对分子量进行测量；另一种是使用ESI-MS高分辨率质谱分析电喷雾得到的多电荷信号，然后对信号进行去卷积分析，获得精确分子量数值。这两种方法各有其优点及适用的领域。百泰派克生物同时配备了这两种质谱分析系统，可用于各类蛋白质样品分子量测定，满足包括肽指纹图谱分析及蛋白质鉴定在内的多种蛋白质分子量分析需求，河北多基因联合检测迈杰转化医学NGS平台经验丰富。ESI电离喷雾测定分子量案例分析：1大于10KDa分子量的某蛋白药物精确分子量测定百泰派克通过online反相色谱分离后，直接用QExactive质谱仪对原始信号进行采集。然后使用ProMassforXcaliburTM对原始数据进行deconvolution计算，得到样品精确分子量。进入质谱之前的反相色谱分离过程中连接了紫外检测器（如下图所示），在实现对样品分离的同时，河北多基因联合检测迈杰转化医学NGS平台经验丰富，还会对样品的纯度进行评估；色谱分离的过程也降低了在精确分子量检测过程中对样品纯度的要求。利用软件对质谱原始数据进行分析时，可以根据TIC（总离子流图）分别对样品中的主要成分和次要成分的分子量进行选择和分析，河北多基因联合检测迈杰转化医学NGS平台经验丰富。例如我们对上图中红框标注的主要成分进行分子量分析，我们只需要找到该时刻得到质谱原始数据（如下图所示）。迈杰转化医学提供完整的多平台多组学服务，打造流程化yao企业合作。河北多基因联合检测迈杰转化医学NGS平台经验丰富

    且是随机错误，而不是聚集在读取的两端；③数据可实时读取；④通量很高(30x人类基因组有望在***内完成)；⑤起始DNA在测序过程中不被破坏；⑥样品制备简单又便宜；⑦可直接测序RNA。2、PacBioSMRT纳米孔+荧光可逆终止dNTP技术原理：PacBioSMRT技术其实是应用了边合成边测序的思想（使用4色荧光标记4种碱基），其超长读长的关键在于使用了活性持久且高保真的DNA聚合酶，并以SMRT芯片为测序载体（ZMW原理）。优势劣势：①SMRT技术的测序速度很快，每秒约10个dNTP；②错误率较高，达到15%，出错随机，可通过多次测序来进行有效的纠错（如使用Sparc对30X的数据进行分析，错误率可达到）；③原始DNA不被破坏；④读长可达10kbp。3、HelicosHeliscope单分子荧光可逆终止技术原理：该技术基于边合成边测序的思想，将DNA随机打断成小片段分别进行dNTP荧光标记，经过不断地重复合成、洗脱、成像、淬灭过程完成测序。主要步骤：①制备：DNA打断加polyA+Cy3②测序：dNTP荧光可逆终止特点：①读取长度约为30-35bp，每个循环的数据产出量为21-28Gb；在测序完成前，各小片段的测序进度不同；②可根据同聚物的合成会导致荧光信号的减弱这一特点来推测同聚物的长度。重庆专业迈杰转化医学NGS平台值得推荐经多平台平行验证（MSI-PCR、MSI-NGS)，一致性高，特异性好.

    二代测序是一个强大的功能平台，它可以同时给数以万计的DNA分子进行测序。由于这种可以多个样本同时测序的能力，在个性化医疗、遗传疾病和临床诊断等方面，二代测序也就是高通量测序开创了革命性的领域。早在1900年代就发明的Sanger测序法，成为了DNA测序的黄金法则，即便到了***它仍被***用来进行常规测序和NGS数据的验证。它利用高保真DNA聚合酶生成与单链DNA模版互补的拷贝。在每个反应中，一个可以特异性识别模版的单链引物，可以从3端开始启动DNA合成，根据碱基互补配对原则，脱氧核糖核苷酸或简单的核苷酸是一个接一个的与模版配对。NGS平台自身的软件大多是做分析及报告的，样本管理或者实验管理一般需要单独上信息化，对整体业务效率还是有明显提高的。

    商业转载请联系作者获得授权，非商业转载请注明出处。3、LifeTechnologiesSOLID：ABI于2007年底推出SOLID系统，之后不断升级至SOLID4。SOLID测序过程中以连接反应取代聚合反应。具体测序流程为：（1）文库制备：将基因组DNA打断，在其两头加上接头，构建成文库；（2）乳液PCR／磁珠富集。此过程与454测序技术类似；（3）微珠沉积；（4）连接测序；（5）数据分析。454测序、Solexa、Solid均是边合成边测序原理，454和Solid均有乳液PCR过程。IonTorrent:2007年454技术创始人罗森伯格创办IonTorrent。LifeTechnologies于2010年收购了IonTorrent，同年推出个人化基因组测序仪PGM。2012年推出IonProton测序仪。Proton更侧重人基因组、外显子组、全转录组测序。PGM测序仪的设计是基于半导体芯片技术，在半导体芯片的微孔中固定DNA链，随后依次掺入ACGT。随着每个碱基的掺入，释放出氢离子，在它们穿过每个孔底部时能被检测到。不需要激光、照相机或标记。现有平台:Solid3,Solid4(100G),IonPGM和IonProton。 迈杰中心实验室设有SLAN 96P、Rotor-Gene Q、ABI 7500、ABI ViiA7、Roche z480等实时荧光定量PCR仪及数字PCR仪！

    PacBio技术的优缺点PacBio技术的优点：无需PCR扩增，不会人为的引入突变；超长读长，平均读长可达到10Kb，**长读长可以达到40Kb；覆盖均匀，无GC偏好性；通过reads的自我矫正，10X以上准确率能够达到；可以直接检测到甲基化信息，同步进行表观遗传学识别。PacBio技术的缺点：单条序列错误率较高，平均核苷酸准确性不到85%；测序成本较贵。PacBio技术的应用基因组组装利用PacBio测序平台，可以克服部分序列GC含量高或重复序列多等问题，更好的进行基因组详细描绘，从而进行精细的基因注释等研究。PacBio测序平台不需要进行PCR扩增，因此可以减少基因组组装过程中的人为错误和偏差。PacBio测序平台读长较长，因此相比二代测序拼接结果更为准确，同时可以利用其长片段来填补二代数据组装中产生的gap和连接contig为scaffold。全长转录组测序利用PacBio测序平台读长较长的特点，进行转录组测序可以直接得到转录本的全长序列，省去了二代测序的拼接过程，使得过程更为简便，结果更为准确。 迈杰转化医学致力于解决创新药物的研发痛点及患者的用药痛点，助力精z准医疗！重庆专业迈杰转化医学NGS平台值得推荐

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    01FGFR简介及信号通路成纤维细胞生长因子受体(FGFR)是高度保守、***分布的跨膜酪氨酸激酶受体，包括FGFR1、FGFR2、FGFR3、FGFR4四种受体亚型。成纤维细胞生长因子（FGF）与FGFR结合时，受体二聚化，从而引起受体激酶结构域的细胞内磷酸化、细胞内信号传导和基因转录的级联反应[1]。由FGFR***的信号转导通路包括RAS–RAF–MAPK，PI3K–AKT，STAT和PLC途径，它们参与调控多种生物学过程，如***发育、血管新生、细胞增殖、迁移、抗凋亡等（图1）。图1FGFR信号通路[2-4]当FGFR发生突变或者过表达时，会引起四个关键的下游信号通路的过度***，并进一步诱发正常细胞*变：RAS-RAF-MAPK和PI3K-AKT过度***可分别刺激细胞增殖与分化及抑制细胞凋亡；SATA与促进**侵袭和转移，增强**免疫逃逸能力密切相关；PLCγ信号通路则是**细胞转移调控的重要途径。 河北多基因联合检测迈杰转化医学NGS平台经验丰富

迈杰转化医学研究（苏州）有限公司于2013年成立，其前身为凯杰（苏州）转化医学研究有限公司。基于基因组学、蛋白组学、细胞组学及病理组学等综合性转化医学平台，丰富的伴随诊断开发经验，高质量的管理体系以及高素质的研发管理团队，迈杰转化医学为全球合作伙伴提供***生物标记物发现、靶点验证、新药临床试验病人的分型研究和入组筛选、伴随诊断开发与商业化、患者用药指导检测等一体化解决方案，并已迅速发展成为中国伴随诊断领头创新企业，致力于解决创新药物的研发痛点及患者的用药痛点，助力精细医疗！

迈杰转化医学研究（苏州）有限公司是一个基于转化医学为医疗提供完整解决方案的创新型公司,凭借生物科技技术和设施以及强大的团队，为我们的合作伙伴提供从生物标志物的研发、到伴随诊断和即时诊断产品的研发、并一直到临床检测及商业化的一站式服务。