智立中特--W303-1A酿酒酵母菌株的简介和使用说明

  W303-1A酿酒酵母菌株的简介和使用说明

　　一.产品信息：

　　菌株名称：W303-1A酿酒酵母菌株

　　平台编码：zl-059691

　　产品形式规格：甘油菌1mL

　　储存：﹣80℃

　　二.基因型：

　　MATa{leu2-3,112trp1-1can1-100ura3-1ade2-1his3-11,15}

　　三.基本信息：

　　培养基：YPD

　　菌株类别：酵母菌

　　培养条件：28℃，有氧，YPD

　　质粒转化：电激

　　保存方式：15%甘油，-80℃

　　四.菌株简介：

　　W303-1Apossessesaybp1-1mutation(I7L,F328V,K343E,**71D)whichabolishesYbp1pfunction,increasingsensitivitytooxidativestress.

　　References:W303constructedbyRodneyRothstein(seedetailednotesfromRRandStephanBartsch).

　　ybp1-1info:Vealetal.(2003)J.Biol.Chem.278:30896-904.

　　Sources:Biosystems:YSC1058

　　五.W303-1A酿酒酵母菌株使用说明

　　1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；

　　2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；

　　3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；

　　4、42℃热激90s，再冰浴2min；

　　5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；

　　6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；

　　7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；

　　8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；

　　9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。

　　六.注意事项

　　1、如果您收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。

　　2、如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。

　　智立中特（武汉）生物科技有限公司是一家集生物研发，生产，销售，售后为一体的**产业公司。拥有载体质粒，载体，国内外微生物菌种资源，感受态细胞，培养基，细胞株等广泛的生产销售线。