细胞培养-友名生物技术

细胞传代

细胞密度达到80%~90%时．去培养基，10ml PBS清洗2次。加入3ml含0．25%EDTA的胰蛋白酶，放人细胞培养箱3min。加人1ml DMEM完全培养基终止胰酶消化，转移至15ml离心管。

加入10ml PBS清洗细胞培养盘，细胞培养，转移至15ml离心管，2000rpmX2min，弃上清液。再加入10ml PBS（经高压灭菌，保存于40C），吹匀，吸取10微升进行计数，按照1×106/盘接种，在含5%CO2的细胞培养箱继续培养。

iPS细胞

基本概念：诱导多能iPS细胞(induced pluripotent stem cells， iPS cells )起初是日本人山中申弥( ShinyaYamanaka)于2006年利用病毒载体将四个转录因子(Oct4， Sox2， KIf4和c-Myc)的组合转入分化的体细胞中，使其重编程而得到的类似胚胎iPS细胞的一种细胞类型。随后世界各地不同科学家陆续发现其他方法同样也可以制造这种细胞。

细胞可分为iPS细胞、多能iPS细胞和单能iPS细胞，诱导多能iPS细胞即通过向体细胞幄入诱.导基因，使体细胞重编程获得具有胚胎iPS细胞样特性的多能iPS细胞，也称为去分化。

细胞复苏

将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移人15ml离心管中，加入10ml预热的DMEM完全培养基，轻轻吹匀，离心，2000rpmX2min，弃上清液。

加入10ml DMEM培养基清洗，弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基，轻轻吹打，接种于10cm盘中，在含5%CO2的细胞培养箱中培养。

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