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液相色谱是如何工作的?
在柱层析中,溶剂在重力作用下滴入装有吸附剂的色谱柱中。液相色谱是一种改进的柱色谱。在高达400个大气压的高压下,泵输送溶剂通过色谱柱。柱吸附剂或固定相通常是由固体颗粒(如二氧化硅或聚合物)制成的颗粒材料。
与柱色谱相比,利用泵输送,不仅可以快速分析,而且可以使用较小的颗粒作为柱填料。粒子越小,其表面积较大,通过固定相与流动相及样品组分之间的相互作用,可以较好地实现混合物中各组分分离。流动相通常是溶剂(如水、乙腈、甲醇)的混合物。
混合物的组分由于与吸收剂颗粒的相互作用的程度不同而彼此分离,在此过程中不同组分的洗脱速率不同,从而导致组分流出色谱柱时分离。与柱色谱相比,液相色谱自动化程度高,灵敏度高。
液相色谱常见类型有哪些?
常见的两种是正相液相色谱和反相液相色谱。
正相液相色谱
柱内填充有微小的二氧化硅颗粒和非极性溶剂,例如正己烷。典型柱的内径为4.6 或较小,长度为150至250 。混合物中的非极性化合物通过色谱柱的速度较快,因为极性化合物比非极性化合物在极性二氧化硅上的粘附时间较长。
反相液相色谱
柱内填充二氧化硅颗粒,并对其进行改性,通过将长的碳氢链(8~18个C原子)附着在其表面来实现其非极性。使用极性溶剂,例如水和醇的混合物,甲醇。由于极性溶剂和混合物中的极性分子之间具有强烈的吸引作用,混合物中的极性化合物将较快地通过色谱柱。非极性分子在通过色谱柱的过程中速度会减慢。它们主要通过范德华分散力和疏水作用与烃基形成不同程度的吸引力。它们在水流动相组分中的可溶性也较低,有助于它们与烃基的相互作用。
岛津液相色谱仪的适用范围:
液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。与试样预处理技术相配合所达到的高分辨率和高灵敏度,使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能,能够分离复杂相体中的微量成分。随着固定相的发展,有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离成为解决生化分析问题。
岛津气象液相主要特点
LC-2010HT是以分析率·有效性确认自动化为理念开发的新一代HPLC。由脱气单元、低压梯度单元、泵单元、混合器、自动进样器、柱温箱以及UV-VIS检测器构成,使用标准化配置管构成一体化装置,提高了系统的可靠性。
几乎没有装置间的差异,方法转换简便。的准确性、梯度浓度准确性,以及几乎不产生交叉污染的进样准确性,使数据可靠性大幅提高。
LC-2010HT有两种类型,标准性LC-2010AHT与配带样品冷却器的LC-2010CHT。从常规LC到半微量LC,用途广泛。
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