酶标记: (30倍浓缩)HRP标记抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 0.4mL x 13 标准品: 重组小鼠白介素-6 0.5mL x 24 缓冲液: 含1% BSA,马鞍山检测试剂盒, 0.05%吐温20 BPS 30mL x 15 标记稀释液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 12mL x 16 显色剂: TMB底物液 15mL x 17 终止液: 1N硫酸 12mL x 1
8 浓缩洗涤液: (40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1 操作说明 1实验所需器材(但试剂盒没有提供)
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加酶标:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,检测试剂盒生产,洗涤。4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,检测试剂盒厂家,37℃ 10~30分钟。5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“ ”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,atp检测试剂盒,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
终止液(3M H2SO4):蒸馏水178.3ml,逐滴加入(98%)21.7ml。(5) 底物缓冲液(PH5.0磷酸枣柠檬酸):0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml0.1M柠檬酸(19.2克/L) 24.3ml加蒸馏水50ml。(6) TMB(四)使用液:TMB(10mg/5ml无水乙醇)0.5ml底物缓冲液(PH5.5) 10ml0.75%H2O2 32μl(7) ABTS使用液:ABTS 0.5mg底物缓冲液(PH5.5) 1ml3%H2O2 2μl(8) 抗原、和酶标记。(9) 正常人和阳性对照。![]()
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