中净环球净化可提供动物房,动物实验室,动物洁净室,动物无菌室的咨询、规划、设计、施工、安装改造等配套服务。
动物实验室配套工艺设备选型
饲养实验动物的设施和设备主要包括:① 材料清洗、消毒和转移设备;② 人员进入所需的设备;③ 动物饲养和运输设备;④ 饮用水设备和消毒设备。
1、 材料清洗、消毒和转移设备
只有在清洁和消毒后,笼子才能重复使用。
物品进出洁净区通常有三种方式,包括高压灭菌器、渡槽和转移窗(舱室)。这些设备通常安装在消毒前室和消毒后室的隔墙上。设备安装应综合考虑设备维护和运行空间。房间高度至少应为2.9m,国外指南建议大于3.3m。
(1) 笼式垫圈
使用自动洗笼设备代替人工,可提高工作效率,降低人工成本。随着现代动物设施规模的不断扩大,它已成为一种发展趋势。目前,自动洗笼设备主要分为柜式和隧道式。
1.柜式洗笼机有多种型号,可清洗各种实验动物笼。有些型号可以使用的保持架来清洁保持架盒。柜式笼式洗衣机相对成熟,结构简单,操作方便。设计时应预留设备基础。
2.隧道罐笼清洗机隧道罐笼清洗机主要用于清洗罐笼箱体。可一次进行清洗干燥操作,用户可根据自身需要增减相应功能段,满足个性化需求。
隧道笼式洗衣机一般不需要预留地基,但设备通常需要大量的场地、电力、水和蒸汽。设施设计时,应预留足够的设备所需的公用设施消耗。
(2) 高压灭菌器
安装在物料进入洁净区的通道内,主要用于饲料、填料、笼、敷料、仪器、器具的消毒和无害化处理。主体穿过屏障墙,设有两扇门,一扇门在非清洁空间打开,另一扇门在清洁(或相对清洁)控制区域打开,可将灭菌材料取出使用。
(3) 渡槽
不耐高温和高压的材料可通过渡槽进入洁净区。渡槽是一个包含消毒溶液的水箱,跨越非清洁区域和清洁区域。不耐高温高压的材料和仪器应从非洁净区一侧放置,浸泡消毒,然后从洁净区取出使用。
(4) 传送窗(传送柜、传送室)
穿过非洁净区和洁净区的金属箱装有紫外线灯,并打开两扇联锁门。不耐高温和高压且不能在水中浸泡的材料从非清洁区域一侧的门放入。打开紫外线灯消毒后,从洁净区一侧的门取出。
根据动物的大小和清洁程度,动物进出清洁区的方式略有不同。
小动物也可以像物品一样通过转移窗口(转移柜和转移舱)进入清洁区域。根据具体要求,大型动物在沐浴、检疫和隔离观察后进入清洁区。
2、 人员进入
在空气淋浴房的洁净室内,在动态条件下,和灰尘的来源是操作员。在操作员进入洁净室之前,附着在其衣服表面的灰尘颗粒可通过空气淋浴室中的清洁气流吹走。
3、 动物饲养和运输设备
(1) 笼子和笼子
当笼外环境符合质量控制标准时,饲养动物的小环境质量在很大程度上取决于笼和笼架。笼子应为动物提供足够的活动空间,通风良好,采光良好;坚固耐用,里面的动物不会逃跑,外面的动物也不会闯入;易于操作、消毒、清洁、储存和运输。
笼架是支撑笼架的支架,使笼架能够合理放置。有的还配备了动物粪便自动冲洗装置和自动饮水装置。注意笼架与笼架的配合,便于移动、清洁和消毒。
(2) 单通风笼(IVC)和隔离器
IVC配有空气净化装置和通风系统。放置在普通房间内,可用于SPF动物的饲养、繁殖和观察。层流架根据实验需要也可分为正压和负压。IVC*设备即可立运行,适合小型和短期使用。设备可以控制空气净化指标和通风指标,而其他环境指标(如温度、湿度等)则需要在设施内进行控制,因此使用有很大的局限性。
隔离器是一个全密封装置,用于保持发动机罩内的环境。环境指示器由发动机罩外的设备控制。无菌动物隔离器为正压装置,负压隔离器用于感染动物实验。
(3) 运输笼
SPF级动物运输笼配备空气过滤和通风系统以及控制温度和湿度的装置。运输车辆还配备了各种环境指标的控制系统,以形成可移动的实验动物饲养设施。
4、 饮用水设备
动物饲养饮用水设备一般采用饮用水瓶、饮水盆和自动饮水机。
中净环球净化可提供动物房,动物实验室,动物洁净室,动物无菌室的咨询、规划、设计、施工、安装改造等配套服务。 构建动物细胞培养室和植物细胞培养实验室(三)
11.培养用器皿:
(1)培养器皿:供细胞接种、生长等川的器皿,可由透明度好、无毒的小性硬质玻璃或无毒而透明光滑的特制塑料制成。
(a)玻璃培养器皿的优点是多数细胞均可生长,易于清洗、消毒,可反复使用,并且透明而便于观察;缺点是易碎,清洗时费人力。
(b)塑料制培养器皿的优点是一次性使用,厂家己消毒灭菌密封包装,打开即可用于细胞培养操作。
常用的培养器皿:
培养瓶:巾玻璃或塑料制成。主要用于培养、繁殖细胞。进行培养时培养瓶瓶口加盖螺旋瓶盖或胶塞,胶塞多用于密封培养。国产培养瓶的规格以容 U(ml)表示,如 250ml、100ml、 25ml等;进口培养瓶则多以底而积(cm2)表示。
培养皿:由玻璃或塑料制成,供盛取、分离、处理组织或做细胞毒性、集落形成、单细胞分离、同位素掺入、细胞繁殖等实验使用。常川的培养皿规格有 10cm、9cm、6cm、3.5cm 等。
多孔培养板:为塑料制品。可供细胞克隆及细胞毒性等各种检测实验使用。其优点是节约样本及试剂,可同时测试大呈样本,易于进行无饱操作。培养板分为各种规格,常用的规格有:96孔、24孔、12孔、6孔、4孔等。
各种单层牛.长的细胞在培养器皿中长满时可获得的细胞数,主要是取决于器皿的底表妞积和细胞体积的大小。常用培养器皿及可获得的细胞数(以 Hela 细胞为例)。
(2)培养操作有关的器皿:
a.贮液瓶:主要用于存放或配制各种培养川液体如培养液、血清及试剂等。贮液瓶分力各种不同规格,如 1000ml、500ml、250ml、100ml、50ml、 5ml 等。
b.吸管:主要分为刻度吸管、无刻度吸管。刻度吸管主要用于吸取、转移液体,常用的有1ml、2m1、5ml、10ml 等规格。无刻度吸管分为直头吸管及弯头吸管,除可以作吸取、转移液体外,弯头尖吸管还常用于吹打、混匀及传代细胞。
c.加样器(移液器):用于吸收、移动液体或滴加样本。可根据需要调节量的大小,吸量准确、方便。尤以微量加样器,可保证实验样品(或试剂)含量,重复性良好。n前,可高温消毒的,多通道的各类移液器可供使用者选择,能确保加样准确、快速、方便并且达到无菌要求。
(3)其他用品:尚有收集细胞用的离心管,放置试剂或临时插置吸管用的,装放吸管以便消毒的玻璃或不锈钢容器,用于存放小件培养物品便于高压消毒的铝制饭盒或贮槽,套于吸管**部的橡胶吸头,封W各种瓶、管的胶塞、盖子、冻存细胞用的安瓿或冻存管、不同规格的器、烧杯和:U:筒以及漏斗,**净工作合使用的酒精灯,供实验人员操作前清洁消毒手使用的盛有酒精或其他消毒液的微型喷壶等。
m.器械:主要用于解剖、取材、剪切组织及操作时持取物件。
(1)常用的有:手术刀或解剖刀、手术剪或解剖剪(弯剪及直剪),川于解剖动物、分离及切剪组织,制备原代培养的材料;虹膜小剪(弯剪或直剪),用于将组织材料剪成小块;血管钳及组织镊、镊(弯、直),用于持取无菌物品(如小盖玻片)夹持组织等;口腔科探针或代川品,川以放置原代培养之组织小块。
(2)设备:细胞培养实验室除了应配备上述的常川基本设备以外,如有条件,可添
置一些或的设备仪器,以使较行效、较、较深入地进行实验室工作。
例如:
1.酶联*检测仪,可用于进行*学测定及细胞毒性、药物敏感性检测等。
2.温冰箱(-85℃) 便于储存某些试剂及标本。
3.旋转培养器 用丁某些细胞或需要收获大量细胞的培养。
4.荧光显微镜 进行荧光染色样来的观察。
5.流式细胞仪 可较及快速检测细胞。
6.用丁检测细胞培养条件的各种仪器,例如为快速分析细胞培养基中主要或关键营养成分、代谢产物及气体含M设计的多功能细胞培养分析仪、手提式浓度测定仪等。
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构建动物细胞培养室和植物细胞培养实验室(二)
实验室内,还会有以下常用的基本设备。
I.仪器:
1)显微镜:倒置显微镜是组织细胞培养室所必需的日常工作常规使用设备之一,便于掌握细胞的生长情况并观察有无污染等。
2)培养箱:体外培养的细胞和体内细胞一样,需要在恒定的温度下生存,大多数情况下,适温度是 37'℃,温差变化一般不应**过±0.5'℃,细胞在温度升高 2^C时,持续数小时即不能耐受,40°℃ 以上捋很快。因此需要有能控制温度的培养箱,如具有较高灵敏度的恒温培养箱及CO₂培养箱。
3)干燥箱:川于细胞培养箱的有些器械、器皿需要烘干后才能使用,玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时,电热干燥箱升温较高,一般需达到 160°c 以上。通常使用鼓风式电热干燥箱。其优点是温度均匀、效果较好,缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始,至 10(TC时,停止鼓风,应避免包裹器皿的纸或棉花烧焦,烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后,不能立即打开箱门以免骤冷而导致玻璃器皿损坏,应等候温度自然下降至 100°c以下方可开门。
4)水纯化装置:细胞培养对水的质量要求较高,细胞培养以及与细胞培养工作相关的液体的配制用水必须事先严格纯化处理。水纯化时可采用离子交换装贾或蒸馏器。离子交换纯水尚不能有效去除**物,因此用水时尚需冉次蒸馏。进行细胞培养时配制各种培养液及试剂等均需使用三次蒸馏水:即使是用于玻璃器皿的冲洗,也应使用二次以上蒸馏水。
5)冰箱:细胞培养室必须配备。
普通冰箱或冷藏杞
储存培养液、生理盐水、Hank’s液试剂等培养用的物品及短期保存组织标本
低温冰箱(-20 °c)、温冰箱
用于储存需要冷冻保存生物活性及较长时期存放的制剂,如酶、血清等。
细胞培养室的冰箱应属,不得存放易挥发、易燃烧等对细胞有害的物质,且应保持清洁。
6)细胞冷冻储存器:储存器常用的是液氮界器。根据使用需要分为不同的类型及多种规格。选择购置液氮容器时要综合考虑容积大小,取放使用方便及液氮挥发量(经济)三种因素。液氮界器的大小可自25L~500L,可以储存1m1的安甑250~15000个左右液氮温度可低达-196℃,使用时应防止冻伤。由于液氮不断挥发,应注意观察存留液氮情况,及时定期补充液氮,避免挥发过多而致细胞受损。
7)离心机:进行细胞培养时,常规需要进行制备细胞悬液、调整细胞密度、洗涤、收集细胞等工作,通常需要使用离心机。
一般可常规配置 4000rpni 的国产台式离心机,例如细胞沉降,使用 80~100g的离心机即可,离心力过大有时可能引起细胞的损伤。
另外,可根据需要添置其他类型如大容显或可调节温度的离心机等。
若需用途,例如某些细胞的分离制备需梯度离心,则需另行配置实验所需的具备其他功能的离心机。
8)天平:常用的有扭力天平、精密天平及各种电子天平。
分析大下的感;W:为 0.1mg、0.01mg和10.001mg。根据称取物质的;W:和称精度的要求,选择适宜级别的天平。要求精密称定时,当取样量大于 100mg 选用感量为 0. 1mg 天平,在 100— 10mg选用感量为 0.01mg 天平,小于10mg选用感量为 0.001mg 天平。
9)消毒器:直接或间接与细胞接触的物品均需消毒灭菌处理。
10)滤器:目前细胞培养工作中采用的培养用液,包括人工合成培养液、血清、消化用胰酶等常含有维生素、蛋白、多肽、生长因子等物质,这些物质在商温或射线照射下易发生变性或失去功能,因而上述液体多朵用滤过沙毒以除去细胞。
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实验动物房设计标准规范
实验室根据实验动物微生物控制标准,可将实验动物分为,分别是普通动物、清洁动物、无病原体动物、无菌或悉生动物。
1一级普通动物
一级普通动物(CV),不携带共患病病原和动物烈病原的实验动物。
其饲育环境为开放系统,无空气洁净度要求。
2二级清洁动物
二级清洁动物(CL),除普通级动物应排除的病原外,不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原。来源于SPF动物或剖腹产动物。
一般饲养于半屏障系统。
3无病原体动物
无病原体动物(SPF),是指动物体内无特定的微生物、存在,但带有非特定的微生物、的动物。主要指不携带潜在感染、条件致病和对实验干扰大的病原。来源于剖腹产动物,饲养于屏障系统。
4无菌动物(GF)或悉生动物(GN)
无菌动物(GF)或悉生动物(GN),无菌动物指用现有检测技术在动物体内外的任何部位均检不出任何活的微生物和的动物。
无菌动物来源于剖腹产或无菌卵的孵化,饲养于隔离系统内。
悉生动物或称已知菌动物,广义上把无菌动物、已知菌动物、无特定病原体动物统称悉生动物;狭义上指已知菌动物。
5四类实验动物的病理检查标准
在病理学检查上,四类实验动物也有不同的病理检查标准。
一级:外观健康,主要不应有病灶。
二级:除一级指标外,显微镜检查**级微生物病原的病变。
:无病原体动物。**、微生物病原的病变。
:不含二、微生物病原的病变,脾、淋巴结是无菌动物组织学结构。
6动物房设计管理上的要求
对不同级别的实验动物在动物房设计上和管理上则有不同的要求。
无菌、已知菌以及无病原体动物都需要在无菌或尽可能无菌的环境里饲养,这种环境,目前**上通用称为屏障环境,即用一道屏障把动物与周围污染的环境隔开,就如胎鼠在母鼠内一样。这种环境从控制微生物的角度分为隔离系统、屏障系统、半屏障系统、开放系统和层流架系统等类。
7隔离系统
是在带有操作手套的容器中饲养动物的系统,用于饲养无菌动物和悉生动物。内部保持按微生物要求的100级的洁净度,但其设置的房间及操作人员不必按无菌室考虑。
8屏障系统
把10000~100000级左右的无菌洁净室作为饲养室,主要用于无病原体动物的长期饲养和繁殖。入室施行严格管理,如淋浴、换贴身衣服等。
半屏障系统
放宽对屏障系统中人及物出入房间时的管理,平面组成大致与屏障系统相同。
9层流架系统
笼具放在洁净的水平层流空气中。常用于小规模饲养,但在一般房间进行饲养、操作和处理时有被污染的危险性。可用于半屏障的补充。
10开放系统
是对人、物、空气等进出房间均不施行消除污染的系统,但通常要进行某种程度的清洁管理。
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