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视频作者：北京创新通恒科技有限公司

高效液相色谱仪-色谱柱的使用和保养

色谱柱是高效液相色谱仪主要的部件，被测物质能否被很好的分离和测定，色谱柱的性能起着决定性的作用。因此，在日常工作中，应特别注意色谱柱的正确使用和维修保养，以延长色谱柱的使用寿命。

1、使用预柱和保护柱。

预柱(pre-column)安装于泵和进样器之间，它给色谱柱中的流动相提供了完全的平衡，并防止了对柱填料有破坏作用的组分或污染物进入色谱柱。保护柱(guard column)可以阻挡能够牢固地吸附于色谱柱上的组分进入色谱柱，保护柱应与色谱柱的填料相同。预柱和保护柱可以经常更换，高效液相色谱费用，而不需要经常更换色谱柱，这就延长了色谱柱的使用寿命。

2、防止气体进入色谱柱。

有些色谱柱(如凝胶柱)是不允许气泡进入的，否则将会使柱效降低甚至形成微小的难以驱除的气室。因此，为了防止气泡进入色谱柱，高效液相色谱报价，一定要使用经过脱气的流动相，并且要严格按照下列步骤来安装色谱柱。a.拆卸下色谱柱入口处的密封螺丝，观察是否有溶剂渗出；b.如有溶剂渗出，即可将色谱柱接到管路上，以避免气泡的进入；c.如无溶剂渗出时，广州高效液相色谱，表明色谱柱的此端已经进去空气了，此时，可将色谱柱的出口端接到进样阀上，高效液相色谱哪家好，以流动相来反方向冲洗色谱柱，以便将柱内的空气排除。以0.2ml/min的小流量来冲色谱柱，如果溶剂的流速太快或者是压力突然的上升都将会导致柱性能的降低；d.如果流出的溶剂里不含有气泡，说明柱内的气体已经被排出了，再将色谱柱以正确的方向接好，这样气泡就进不到色谱柱里面了。

3、色谱柱的清洗。

为了不使被测物质和杂质停留在色谱柱中，在每次的样品分析工作完成之后，都应及时地清洗色谱柱。

4、色谱柱的存放。

HPLC对流动相的一般要求

流动相就比如人体的血液，其质量直接影响到整个系统的正常运行与否。

copy; 应该使用HPLC级的溶剂，不能互相混溶的溶剂不可以直接切换！

copy; 注意溶剂的截止波长。截止波长是指该溶剂可以在紫外检测器中使用的很低波长，低于该波长后，溶剂会有很强的紫外吸收，从而影响极限的稳定性、干扰对所分析物质的检测。

copy; HPLC所使用的水必须是新鲜的和经过0.45μm滤膜过滤过的。建议每天更换新鲜的水。长期不用时，必须把使用水的管路用有机的溶剂置换，防止长霉。

copy; 仪器使用完后要采用适当的溶剂冲洗等方法维护色谱柱和系统。如果使用了缓冲盐一定先将盐要冲洗干净。

copy; 当有流路堵塞时，可以尝试将之反接后冲洗。污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将会缩短溶剂过滤器的使用寿命，并且影响泵和系统的的性能。这在水溶剂或磷酸盐缓冲液(pH 4 至7) 中尤其如此。

高效液相色谱法概述

高效液相色谱(HPLC)是20世纪60年代后期发展起来的分离分析技术，是现代分离测定的重要手段。问世以来，因其具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度好、能分析高沸点但不能气化的热不稳定生理活性物质的特点而被广泛应用于生物化学及临床分析。

在现代高效液相色谱分析中，色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏，选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间，并且使方法更具稳定性。

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北京创新通恒科技有限公司是一家致力于分离技术研究及应用的高科技企业。从2000年成立之日起，创新通恒人本着锐意创新，不断进取的精神，秉承“以液相色谱技术，不断拓展应用领域，满足客户不同需求“的企业发展宗旨，克服了一个又一个技术难关，在色谱产品领域，成为国内认可度很高的研究、制造企业之一。“凡事全力以赴，常怀感恩之心“是创新通恒人引以为豪的座右铭，经过二十年的拼搏,公司已发展成为拥有员工总数百余人，生产及办公面积达6000余平方米的中型企业。产品包括实验室液相色谱系统、中试型制备液相色谱系统、生产型工业化制备液相色谱系统;产品线贯穿药品、化工领域内，质检、研发、规模化生产的整个过程。在提供全套硬件设备的同时,创新通恒还拥有分离纯化工艺研究的中试车间，可向客户提供整体解决方案。多年来，公司注重企业建设和技术积累，先后引入ERP、CRM、0A等现代化管理方式，并通过1509001:2000企业管理体系认证，部分产品通过欧盟的CE认证;企业拥有20余项发明及软件著作权;多次获得科学仪器自主创新金奖；先后承担国家十一五重大新药创制项目;在国家专项支持项目中，获得节能减排、创新奖等专项资金，连续被评为中关村瞪羚企业。