斜面低温保藏法对那些能够使用
此方法是很常用的,广泛适用于细菌、酵母菌和霉菌等大多数微生物的短期保藏及不宜用冷冻干燥保藏的。
此方法的缺点是菌株仍有一定程度的代谢活动能力,保藏期短,传代次数多,较容易发生变异和被污染。
正常情况下的保菌期:霉菌和有芽孢的细菌一般可保存6个月左右,无芽孢的细菌可保存1个月左右,酵母菌可保存3个月左右。
低温生物的寄主分离法
即从生长有某种真菌的寄主体上(如茯苓、木耳木段)取下木片,进行分离的方法。如木耳制种时,可选朵大、出耳多、质厚的耳棒(即长有木耳的木段)。后,削去耳根下的树皮,将其横断面锯成1 厘米厚的木片,在无菌条件下,切去无耳菌丝部分,留下有耳菌丝部分,浸入0 . 1 %水中1 分钟,取出再用无菌水冲去木片上的液。然后,用解剖刀将木片切成0 . 5 厘米的小块,放入斜面培养基内,好氧低温生物菌种公司,置24 ~26 ℃下培养,及时淘汰杂菌,选取纯菌丝进行移植培养,即得。
低温生物的分离方法有哪些?
先将所需的种药用真菌回来,选取新鲜、个体大、壮实、中龄及无病虫害的子实体(或菌核、菌索),作为分离用的材料。若为子实体,取其菌盖或菌柄组织;若为菌核,取其全部或部分(如茯苓)菌核;若为菌索,取其部分根状菌索(如蜜环菌)。再用0.1 %或75 %酒精进行表面消毒2 分钟,用无菌水(或冷开水)冲洗数次,洗净残留的药液后切成小块。,然后,放入PDA 培养基的试管或培养皿上,置24 ~26℃温度下,培养5 ~ 7 天。在分离的真菌组织周围见长有白色菌丝时,好氧低温生物菌种,应及时将菌丝移至斜面试管培养基上,再置温度24 ~26 ℃下培养7~10 天,即得纯。所得的纯还可继续扩大培养或保藏。
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