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低温生物的孢子分离法

( 1 )褶上涂抹法:选取新鲜、健壮、未开伞、的子实体，洗净后用0 75 %酒精表面灭菌2 分钟，然后连同培养基一起放入接种箱内，经马林熏蒸消毒12 ~ 24 小时，再按无菌操作技术将接种环在子实体菌褶上涂抹，把涂抹后带孢子的接种环在培养基上划线接种，然后置于25 ~ 28 ℃恒温箱内培养，可得纯。

( 2 )孢子印采集法:取灭过菌的载玻片、试纸或黑布，低温生物菌种多少钱，置于新鲜、未开伞或未开裂的子体菌褶的下方。经24 小时后，便落下孢子，形成印痕(即孢子印)。然后，用接种环或玻璃棒蘸取孢子，接种在平面或斜面培养基上，进行恒温培养，可得纯。

( 3 )孢子收集器采集法:孢子收集器由玻璃钟罩、培养皿、三角架、搪瓷盘等组成。钟罩下为一搪瓷盘，直径25 厘米左右，盘内先垫衬4~6 层纱布，中央放1 副9 厘米直径的培养皿，大盖口朝下，上放小的，口向上。然后，在上面小的培养皿上放1 只铅丝绕成的三角架，再将带孔的玻璃钟罩盖上，顶上罩孔用棉塞塞好，用纱布包好整个孢子收集器，置于高压灭菌锅或蒸笼内灭菌2小时。

低温生物的滤纸保藏法

(1)将滤纸剪成0.5×1.2cm的小条，装入0.6×8cm的安瓿管中，每管1-2张，塞以棉塞，1.05kg/cm2gt;，121.3℃灭菌30分钟。

(2)将需要保存的，在适宜的斜面培养基上培养，使充分生长。

(3)取灭菌脱脂牛乳1-2ml滴加在灭菌培养皿或试管内，取数环菌苔在牛乳内混匀，制成浓悬液。

(4)用灭菌镊子自安瓿管取滤纸条浸入菌悬液内，使其吸饱，再放回至安瓿管中，塞上棉塞。

(5)将安瓿管放入内有二磷作吸水剂的干燥器中，用真空泵抽气至干。

(6)将棉花塞入管内，用火焰按图Ⅶ-13熔封，保存于低温下。

(7)需要使用，复活培养时，可将安瓿管口在火焰上烧热，滴一滴冷水在烧热的部位，使玻璃破碎，再用镊子敲掉口端的玻璃，待安瓿管开启后，取出滤纸，放入液体培养基内，降COD低温生物菌种多少钱，置温箱中培养。

细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保藏，垃圾渗滤液低温生物菌种多少钱，前两者可保藏2年左右，有些丝状真菌甚至可保藏14-17年之久。此法较液氮、冷冻干燥法简便，不需要特殊设备。

低温生物的寄主分离法

即从生长有某种真菌的寄主体上(如茯苓、木耳木段)取下木片，进行分离的方法。如木耳制种时，可选朵大、出耳多、质厚的耳棒(即长有木耳的木段)。采集后，降氨氮低温生物菌种多少钱，削去耳根下的树皮，将其横断面锯成1 厘米厚的木片，在无菌条件下，切去无耳菌丝部分，留下有耳菌丝部分，浸入0 . 1 %水中1 分钟，取出再用无菌水冲去木片上的液。然后，用解剖刀将木片切成0 . 5 厘米的小块，放入斜面培养基内，置24 ~26 ℃下培养，及时淘汰杂菌，选取纯菌丝进行移植培养，即得。

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