1、学校
规模化、标准化较高,技术含量较低,结构比较简单。以化学实验室和物理实验室为主,部份高校会(如医药和食品)有一些对空气质量有要求的洁净实验室。
二、根据分离工作量和研究需要进行选择:
1.一般进行研究和小批量制备时多选用台式离心机;
2.进行大批量制备时多选用大型落地式离心机;
1、差速离心法
差速离心法是指通过不断增加相对离心力,使沉降速度不同的颗粒,在不同离心速度及不同离心时间下分批离心方法。差速离心法一般用于分离沉降系数相差较大的颗粒。
进行差速离心时,首先要选择好颗粒沉降所需要的离心力和离心时间。离心力过大或离心时间过长,容易导致大部分或全部颗粒沉降及颗粒被挤压损伤。当一定离心力在一定的离心时间内进行离心时,在离心管底部就会得到和重颗粒的沉淀,分出的上清液进一步加大转速再次进行离心,又得到*二部分较大、较重颗粒的“沉淀”及含较小较轻颗粒的“上清液”。如此多次离心处理,即能把流体中的不同颗粒较好地分离开,此法所得沉淀是不均一的,仍杂有其它成份,需经再悬浮和再离心(2~3次),才能得到较纯的颗粒。
差速离心法主要用于分离细胞器和病毒。其优点是:操作简单,离心后用倾倒法即可将上清液与沉淀分开,并可使用容量较大的角式转子;缺点是:(1)分离效果差,不能一次得到纯颗粒。(2)管壁效应严重。特别当颗粒很大或浓度很高时,在离心管一侧会出现沉淀。(3)颗粒被挤压,离心力过大,离心时间过长会使颗粒变形、聚集而失活。差速离心的分辨率不高,沉降系数在同一个数量级内的各种颗粒不容易分开,它常用于其他分离手段之前的粗制品提取。各种颗粒的沉降速度遵循式4—10。颗粒愈大,沉降速度也愈大,离心后沉淀到离心和底部所需的时间愈短。
2)等密度离心法
某些密度梯度介质经过离心后会自身形成梯度,如Percoll则可迅速形成梯度,CsCl、Cs2SO4和三碘苯甲酰葡萄糖胺经长时间离心后也可产生稳定的梯度。需要离心分离的样品可和梯度介质先均匀混合,梯度介质由于离心力的作用逐渐形成管底部浓而管**稀的密度梯度,与此同时原来分布均匀的颗粒也发生重新分布。当管底介质的密度大于颗粒的密度即ρm>ρp时,颗粒上浮;当管**介质的密度小于颗粒的密度即ρp>ρm时,则颗粒沉降;后颗粒进入到一个它本身的密度位置即ρp=ρm,颗粒不再移动,形成稳定的区带。等密度离心法需时间较长,一般为十几小时至几十小时。
梯度材料的选择原则 ①对被分离的生物样品无作用,不会使生物样品失活;②在溶液中稳定,在离心作用下不会解离或聚合;③在使用的密度范围中,粘度低,渗透压小,离子强度及pH值变化小;④易与被分离的颗粒分开;⑤不会对离心机设备发生腐蚀作用;⑥便于浓度测定等等。这些原则当然比较理想,完全符合每种性能的梯度材料几乎是没有的。下面介绍几种基本上符合上述原则的梯度材料:
(1)糖类:蔗糖、甘油、聚蔗糖(ficoll)、右旋糖酐、糖原等。
(2)无机盐类:CsCl(氯化铯)、RbCl(氯化铷)、NaCl、KBr等。
(3)**碘化物:三磺苯甲酰葡萄糖胺(martizamide)等。
(4)硅溶胶:Ludox的各种类型,如Percoll。
梯度液的收集 离心后颗粒在梯度液中分层,小心取出离心管,防止振摇以避免分层的
颗粒混和。收集梯度液中颗粒的方法很多,有管底穿孔计滴法、插管虹吸计滴法,浓液**替法和注射器穿孔抽取法等。
盐城市安信实验仪器有限公司是生产、销售离心机的专业企业。公司不断引进国外**并与国内大专院校、科研单位合作,使产品技术紧跟世界**水平,现生产七大系列(实验离心机,小型离心机,低速离心机,冷冻离心机,台式离心机,高速离心机)50余种规格的离心机产品。公司对离心机产品的**技术进行了一系列的深入研究。如:转子**高速实验、**冷冻实验,转子光弹实验,电阻法应变测量试验、轴对称有限元法理论计算等,研制开发了变频电机驱动,微机程序控制等操作简便、安全可靠的新一代离心机。