一、植物组织蛋白质提取方法
1、根据样品重量(1g样品加入3.5ml提取液,可根据材料不同适当加入),准备提取液放在冰上。
4、上样前加入裂解液,室温放置30分钟,使蛋白充分溶于裂解液中,然后离心(15℃8000rpm以上1小时或较长时间以没有沉淀为标准),可临时保存在4℃待用。
五、蛋白质样品制备
秧苗蛋白质样品的提取按Davermal等(1986)的方法进行。
100mg材料剪碎后加入10mgPVP-40(聚乙烯吡咯烷酮)及少量石英砂,用液氮研磨成粉,加入1.5ml10%三(丙酮配制,含10mM即0.07%β-),混匀,-20℃沉淀1小时,4℃,15000r/min离心15min,弃上清,沉淀复溶于1.5ml冷丙酮(含10mMβ-),再于-20℃沉淀1小时,同上离心弃上清,(有必要再用80%丙酮(含10mMβ-所得沉淀低温冷冻真空抽干。
三、组织:肠黏膜
目的:WESTERNBLOT检测凋亡相关蛋白的表达
应用TRIPURE提取蛋白质步骤:
盐城市安信实验仪器有限公司是生产、销售离心机的专业企业。公司不断引进国外**并与国内大专院校、科研单位合作,使产品技术紧跟世界**水平,现生产七大系列(实验离心机,小型离心机,低速离心机,冷冻离心机,台式离心机,高速离心机)50余种规格的离心机产品。公司对离心机产品的**技术进行了一系列的深入研究。如:转子**高速实验、**冷冻实验,转子光弹实验,电阻法应变测量试验、轴对称有限元法理论计算等,研制开发了变频电机驱动,微机程序控制等操作简便、安全可靠的新一代离心机。