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实生融苗培育 将收集的砧木种子，用清水除去种皮和汁液，阴于后放在低温、干燥处保存。播种前两个月，将种子与3-4倍净河砂混合后，放在适宜的温度、湿度和空气条件下砂藏。
1．种子砂藏 种子需要一定的温度、水分、空气和时间才能后熟、发芽。一般山葡萄种子需在一3-5℃的低温和含水5％以内的湿砂里，经过60天左右完成后熟阶段。如种子多时，可选择地势较高、排水良好、无鼠洞的背阴处，挖一条沟，深60-80厘米，长宽按种子多少而定。先在沟底铺20厘米厚的湿砂，然后上面每放一层10厘米厚的湿砂混拌一层种子，要求种子与河砂搅拌均匀，一直到距地面10厘米左右时为止。最后上面再培土高出地面，呈小拱形，以免积水。在砂藏沟中间，每隔2-3米立放一个小标秸把，以利于通风。
种子砂藏期间，要注意检查砂内的温湿度和有无鼠害，特别是春节后，气温不断上升，如温度超过5℃，湿度超过10％，将种子翻倒1-2次，以防发霉。如有种子发霉，可喷洒多菌灵或甲醛消毒后再砂藏。
2．砧木种子催芽 砂藏处理后的种子，播种前7-10天催芽，是提高出苗率的有效措施。催芽的方法是：将砂藏的种子筛出，在清水里浸泡1-2天后，与3倍的河砂混合，均匀平铺在放有塑料膜的电热毯或火炕上，厚5-10厘米，上面盖一层塑料膜或纱布，再放一层混有湿砂的种子，其上再盖一层塑料膜。电热毯或火炕上的温度要保持在20-25℃。在催芽过程中每隔1天上下翻1次，经过5-7天后，种子即可裂嘴露白，30％左右的种子露白时就可播种。
3．砧木种子播种 砧木种子播种时间在早春3-4月，将摧好芽的种子，播在整平的南北向长畦中，畦宽1米，每畦开2-3个小沟，灌足底水。底水渗下后，按株距8-10厘米，在沟内点播或条播，种于上覆盖1.5-2厘米厚的砂壤土，轻轻压实，使种子与土壤紧密接触，以利发芽。如畦面覆盖地膜，保湿增温效果更好。一般播后10一15天即可出苗。30％左右种子顶土出苗时，要及时撤掉地膜，以防地膜压苗、烧苗。
如无地膜，土壤水分蒸发较快，必须盖一薄层稻草。播种后应每隔2-3天用细眼喷壶喷水，保持种层土壤疏松而湿润以利种子发芽。
4．砧木实生苗田间管理 在撤除覆盖物后，要适时除草、松土和喷水，促使幼苗加速生长。幼苗长到2-3片真叶时，要及时间苗或移栽。将过密、过弱或有病的劣苗拔掉，按8-10厘米株距留苗。
幼苗生长过程中要加强水管理。当苗长到5-6片叶时，用0.01％尿素进行叶面迫肥，一般每亩用5-8千克，以后每隔1个月，根部追施1次二铵，每亩15千克即可满足苗木生长需要。到6-7月份，结合喷药叶面喷施0.3％的磷酸二氢钾3-4次。当苗木长到20-30厘米时进行摘心，以促进枝条充实和加粗生长，提高当年嫁接率。如当年嫁接不上，留坐地苗，翌春再进行嫁接。


硬枝条贴苗的培育 各地应用抗性砧木，除了利用种子培育实生砧木外，还可利用抗性砧木的枝条培育插条砧木。如我国北方除了用山葡萄、贝达种子外，利用其枝条，培育插条砧苗进行嫁接，抗性也较强。插条砧苗的培育方法，如种条的收集、选择、冬藏、剪截和生根处理，苗期管理，均与品种扦插苗培育相似，可参考扦插育苗。唯独山葡萄枝条生根力弱，必须用化学生根药物处理与加温催根相结合才能收到理想效果。






(四)绿技劈接方法 绿枝劈接方法，是当前葡萄育苗的主要嫁接方法。
1．嫁接时间砧木和接穗均达半木质化时即可开始嫁接，可一直接到成活的苗木新梢在秋季能够成熟为止。黑龙江、吉林等省北部地区，可从5月中旬至6月中旬，嫁接时间长达1个月之久；辽宁省南部及山东、河北省南部可嫁接两个多月，如与保护地相配合，嫁接时间就更长。
2．接穗采集接穗从品种纯正、生长健壮、无病虫害的植株上采集，可与夏季修剪时的疏枝、摘心、除副梢等项工作结合进行。最好在苗圃附近采取，随剪随接，成活率高。需从外地采取时，剪下的绿枝应及时将叶片去掉，用新湿毛巾和塑料薄膜包好或放在广口保温瓶中，瓶底放少许冰块，途中2-3天可保持接穗新鲜。到达目的地后，将接穗再用湿毛巾一层层包好，放在电冰箱底层3-4℃处，保存3-4天，嫁接成活率仍然很高。无电冰箱时，可将接穗吊在大口井的水面上部保存，效果也很好。
3．嫁接方法主要是劈接。首先选择半木质化的绿枝接穗，芽眼最好利用刚萌发而末吐叶的夏芽，嫁接后成活率高，生长快。如夏芽已长出3-4片叶，则去掉副梢，利用冬芽。冬芽萌发慢，但萌发后生长又快又粗壮。砧、穗枝条的粗度和成熟度一致，成活率高。
嫁接前先将接穗的绿枝用锋利芽接刀或刮脸刀片在每个接芽节间断开，放在凉水盆中保存，温度高时勤换凉水，以便降温。嫁接时，砧木留3-4片叶子，除掉芽眼，将以上部分截断，在断面中间垂直劈开，长2.5-3厘米。选与砧木粗细和成熟度相近的接穗，在芽的下方0.5厘米左右，从两侧向下削成长2.5-3厘米的斜面，呈楔形，斜面刀口要平滑。削好接穗
马上插入砧木的切口中，使二者形成层对齐，接穗斜面要露白0.5毫米，有利愈合。然后用O.5-0.6厘米宽的薄塑料条，从砧木接口下边向上缠绕，只将接芽露出外边，一直缠到接穗的上刀口，封严后再缠回下边打个活结即可(见右图)。
如果绿枝嫁接时间较早，气温偏低时，嫁接缠完塑料条后，再套小塑料袋增温、保湿，以提高成活率。

葡萄组织培养育苗


一、葡萄嫩梢采集与消毒
将大树或扦插苗长出5-7片叶的嫩梢，取5-10厘米长，去掉幼叶。用自来水冲洗3-5分钟，在70％酒精中浸泡30-40秒钟，用蒸馏水冲洗2-3次，再放入0.5％氯化汞溶液中消毒7一10分钟，最后用无菌水冲洗5-6次后备用。



二、培养基制作与筛选
(一)茎尖培养 方1 1／2MS培养基 6-苄基嘌呤(6-BA)0.5一lppm个荼乙酸(NAA)0.01ppm 水解乳蛋白(LH)100ppm 蔗糖2％ 琼脂0.6％配制，氢离子浓度调到1585纳摩／升[pH5.8)。在98.06千帕的压力下，高压灭菌20分钟，冷凉待用。山东酿酒葡萄研究所用此方对白羽、红香蕉、白友谊、雷司令等品种茎尖培养成活率达83.5％以上。
方2 1／2MS培养基 赤霉素(GA)0.1ppm 吲哚乙酸(1BA)0.59pm 6-节基嘻吟lppm 激动素(KT)0.5ppm 硫酸腺嘌呤(Ade)4ppm 琼脂0.6％ 蔗糖0.2％的培养基，对康拜尔芽变(康太)成活较好(辽宁省农科院植保所)。

(二)茎叶分化培养 方1 1／2MS培养基 赤霉素1ppm 吲哚丁酸0.5ppm 6-节基膘吟1ppm 蔗糖2％ 琼脂0.6％，氢离子浓度调到1000纳摩／升(pH6.0)。在98.06千帕高压下灭菌20分钟后备用。辽宁省农业科学院植保所对贝达、红富土、黑奥林、巨峰品种族种成活率达90％以上。
方2 用B5大量元素培养基 MS培养基其他元素 吲哚乙酸(1AA)0.01-0.1ppm 6-苄基嘌呤0.02-0.59pm 腺嘌呤(A)2；ppm或水解乳蛋白1000ppm 蔗糖2％-3％ 琼脂0.7％，氢离子浓度630.9-1585纳摩／升(pH5.8-6.2)，配好后装入三角瓶中，用两层硫酸纸封口，在98.06-117.67千帕的高压锅中灭菌20分钟，冷凉待用。河南省园艺所用此配方对京早晶品种接种成活效果较好。



(三)幼根分化培养 方1 用Bs大量元素培养基 蔗糖4％ 吲哚乙酸1ppm 6-苄基嘌呤0.08ppm 琼脂7％，氢离子浓度1000纳摩／升(pH6)，经高压灭菌20分钟，冷凉备用。辽宁省农业科学院植保所用此配方对红富士、黑奥林、巨峰等品种茎尖培养的单芽段，插入灭菌后的三角瓶培养基中，芽痕高于培养基面3.5毫米，每瓶插入1-3个茎段，插后在黑暗中培养48小时；再转入间歇光照(两支40瓦日光灯下，每天光照10小时)培养，温度保持在23-28℃，20天后幼根平均长分别为99.0，86.3，78.0毫米。
方2 用1／2MS培养基 蔗糖4％ 吲哚乙酸0.4ppm 6-苄基嘌呤0.06ppm 琼脂7％，氢离子浓度1000纳摩／升(pH6)，经过高压灭菌后接种贝达、红宫土、黑奥林、臣蜂，20天后幼根平均长分别为94.0，36.5，16.8，50.8毫米。此培养基对贝达繁殖有较好效果(辽宁省农科院植保所)。



三、接种(茎段试管培养) 在超净工作台上，将彻底消毒过的备用嫩枝剪截2厘米核的单芽茎段，将其下部插入灭菌后的试管培养基中，芽痕高于培养基面3-5毫米，每管插1-3个茎段，在黑暗处培养48小时，再转入间歇光照(两支40瓦日光灯下，每天照10个小时)培养，温度保持在25-28℃，以后光照时间每天可延长12-14小时，光照强度为2000-2500勒。



四、继代培养 将试管苗剪成带叶单芽段，不必消毒，插人培养基中，一般10一15天开始生根，30-35天可长成5.6片叶的小苗，在适宜条件下，1年可繁殖数万株试管苗。



五、炼苗移栽 试管苗长成后移到温室或塑料大绷里，在自然光照下炼苗。要求温度在20-25℃，经两周后将试管塞揭开，使之接受自然光照、温度、湿度锻炼4-5天。用镊子夹叶柄将小苗从培养基中取出，洗去培养基残留物，直接栽入温室或大棚中的小拱棚里的砂壤土或粗砂里，浇透底水。棚内湿度保持在90％左右。10厘米下的地温应稳定在15℃左右，光照为4000-5000勒。15-20天后见幼叶变绿时，即可移植到大田，成活率达80％以上。如棚内温度过高，要通风和盖苇帘遮荫降温，喷洒凉水，提高棚内空气湿度和土壤湿度，以保持炼壮苗的适宜条件。

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