根据不同的检测模式和样品类型,酶标仪需要选配不同波长的滤光片。一般来说,激发滤光片和**滤光片应该匹配样品的激发和**谱,并且两者之间应该有足够的隔离以避免信号干扰。参考滤光片应该选择与激发或**波长相近但不重叠的波长,并且与样品无关。常见的酶标仪滤光片波长有:光吸收模式:340 nm、405 nm、450 nm、492 nm、620 nm等;荧光模式:340/460 nm、360/460 nm、485/535 nm,上海双检测模式酶标仪检验、490/520 nm等;化学发光模式:400 nm、410 nm,上海双检测模式酶标仪检验、430 nm等;时间分辨荧光模式:337/620 nm,上海双检测模式酶标仪检验、355/665 nm等;荧光偏振模式:485/535 nm等。酶标仪的检测速度是指其完成比色测定所需要的时间。上海双检测模式酶标仪检验一般酶标仪的测定波长在400~750nm或800nm之间,完全可以满足ELISA的显色测定。目前国内常见的ELISA试剂盒所使用的标记用酶均为辣根过氧化物酶(HRP),底物通常为四甲基联苯胺(TMB)和邻苯二胺(OPD),其在过氧化氢溶液的存在下,经HRP作用,分别氧化为2,2,—二氨基偶氮苯(DAB)和联苯醌。当pH值为5.0左右时,DAB在450nm波长处有比较大吸收,当pH值降为L 0时,比较大吸收波长移至492 nm,同时摩尔消光系数变大,显色加深,因而常用强酸如硫酸或盐酸终止反应。四川操作简便酶标仪酶联*宝予德K3 Plus酶标仪为8通道垂直光路光密度检测仪,其设计目的是执行标准的光度测量。
酶标仪滤光片的选择和使用应该注意以下几点:滤光片应该根据酶标仪型号和规格进行选购,不同型号的酶标仪可能需要不同尺寸和形状的滤光片。滤光片应该妥善保存和清洁,避免划伤、污染或损坏,影响透过率和稳定性。滤光片应该正确安装和调整,保证与光路的对准和匹配,避免光线的漏失或散射。滤光片应该定期检测和校准,确保其性能符合标准和要求,及时更换老化或损坏的滤光片。滤光片是一种消耗品。建议每年检查两次其情况,以确保仪器正常运作。可以使用板验证包进行检查。酶标仪的震板功能是指酶标仪在对ELISA板孔进行比色测定前对其进行振荡混匀,使板孔内颜色均一。目前市场上常见的酶标仪均有震板功能,所不同的是震板方式,有的可按上下、左右或旋转等方式及振荡幅度等任意调节;有的则较为固定。使用有震板功能的酶标仪,在进行ELISA测定显色反应完成加入终止剂后,可不必振荡混匀,直接放人酶标仪上测定即可。温育功能是指酶标仪本身能按要求自动精确地控制仪器内部的温度,使得ELISA测定中微孔板条的温育过程可在仪器内部完成,而*再外配温箱。目前,只有少部分酶标仪具有此种功能,温育功能只是酶标仪的一个附加功能,是否具有并不能说明酶标仪档次的高低及仪器的优劣。作为实验室是否选择,则可根据自己实验室的条件及需要来决定。光吸收的检测技术成熟,成本低,操作简单。
TMB的氧化产物联苯醌在波长450nm处有比较大消光系数,如果HRP量少,H:O:和TMB过量时,则形成蓝色的阳离子根。降低pH,即可使蓝色的阳离子根转变为黄色的联苯醌,使用硫酸作为终止剂可使产物稳定90min。因此,450nm和492 nm两个波长是目前ELISA测定常用的。各种酶标仪都配有放置滤光片的可自动转换的部件,可以同时安装6~8片滤光片,所配备的滤光片均应包括上述两个波长,有的酶标仪以490nm滤光片替代492nm滤光片,影响不大。除了这两个基本滤光片外,考虑到双波长比色的需要,还应有620nm或630nm或650nm和405nm波长的滤光片,其他滤光片可根据自己的需要选择。有时,有的实验室希望用酶标仪作微量生化测定,故酶标仪生产厂家对其生产的酶标仪扩展了紫外检测功能,此时需要一个340 nm波长滤光片。此时,酶标仪的测定波长范围就成为340—750nm或800nm。酶标仪在生殖保健领域中应用越来越比较广,同时促进了生殖健康技术水平提高。四川操作简便酶标仪酶联*
酶标仪内置滤光片轮,可选择试验所需的不同波长的滤光片来进行分光。上海双检测模式酶标仪检验
宝予德K3 Plus酶标仪测量参数:1. 单波长检测:在一个波长下测量吸光度(也称为终点法)。2. 双波长检测:用两个波长测量吸光度,**终结果为***次的测量结果减去*二次测量的结果。3. 双时法检测:在两个不同的时间点测量板的吸光度。**终结果为*二次测量的结果减去***次测量的结果。4. 动力学检测:测量吸光度变化率。5. 多波长检测:每一列的吸光值用各自不同的波长检测。只在基础酶联程序中可用。K3 Plus酶标仪**于测量通过微孔板的吸光度值,采用8通道垂直检测光路光密度检测理念,**多可同时配置8块滤光片,波长范围400~750nm,仪器性能稳定,较大的彩色液晶触摸屏,可视用户界面,简单易用,在各种科研应用中具有出色的灵活性。上海双检测模式酶标仪检验
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