pcr分子生物实验室 标准pcr实验室平面图

中净环球净化可提供医学实验室、PCR实验室的咨询、规划、设计、施工、安装改造等配套服务。
核酸检测实验室标本采集方法：
应当采集呼吸道标本，包括上呼吸道标本（鼻咽拭子等）或下呼吸道标本（呼吸道吸取物、支气管灌洗液、肺泡灌洗液、深咳痰液等）。其中，重症病例**采集下呼吸道标本；根据需要可留取便标本。对集中隔离人员，要通过鼻咽拭子采集上呼吸道标本；对其他人员，要鼻咽拭子。
1.鼻咽拭子。采样人员一手轻扶被采集人员的头部，一手执拭子贴鼻孔进入，沿下鼻道的底部向后缓缓深入，由于鼻道呈弧形，不可用力过猛，以免发生外伤。待拭子*到达鼻咽腔后壁时，轻轻旋转一周（如遇反射性咳嗽，应停留片刻），然后缓缓取出拭子，将拭子头浸入含2～3ml病毒保存液的管中。
2.口咽拭子（无法采集鼻咽拭子时可选用）。被采集人员先用生理盐水漱口，采样人员将拭子放入无菌生理盐水中湿润(禁止将拭子放入病毒保存液中，避免抗生素引起)，被采集人员头部微仰，嘴张大，并发“啊”音，露出两侧咽扁桃体，将拭子越过舌根，在被采集者两侧咽扁桃体稍微用力来回擦拭至少3次，然后再在咽后壁上下擦拭至少3次，将拭子头浸入含2～3ml病毒保存液的管中，尾部弃去，旋紧管盖。
3.深咳痰液。要求患者深咳后，将咳出的痰液收集于含3ml采样液的50ml螺口塑料管中。如果痰液未收集于采样液中，可在检测前，加入2～3ml采样液，或加入与痰液等体积的含1g/L蛋白酶K的磷酸盐缓冲液将痰液化。
4.鼻咽或呼吸道抽取物。用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取呼吸道分泌物。将收集器头部插入鼻腔或气管，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出，收集抽取的粘液，并用3ml采样液冲洗收集器1次（亦可用小儿导尿管接在50ml器上来替代收集器）。
5.支气管灌洗液。将收集器头部从鼻孔或气管插口处插入气管（约30cm深处），注入5ml生理盐水，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出。收集抽取的粘液，并用采样液冲洗收集器1次（亦可用小儿导尿管接在50ml器上来替代收集）。
6.肺泡灌洗液。局部麻醉后将纤维支气管镜通过口或鼻经过咽部插入右肺中叶或左肺舌段的支管，将其*契入支气管分支开口，经气管活检孔缓缓加入生理盐水，每次30～50ml，总量100～250ml，不应**过300ml。

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洁净车间要做哪些检测
洁净车间检测项目：风速风量、换气次数、温湿度、压差、悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、噪声、照度等。
1、风速风量换气次数
洁净室、洁净区的洁净度主要是靠送入足够量的洁净空气，以排替、稀释室内产生的颗粒污染物来实现的。为此，测定洁净室或洁净设施的送风量、平均风速、送风均匀性、气流流向及流型等项目十分必要。
单向流主要是依靠洁净气流推挤、排替室内、区内的污染空气以维持室内、区内的洁净度。因此，其送风断面风速及均匀性是影响洁净度的重要参数。较高的、较均匀的断面风速能较快、较有效地排除室内工艺过程产生的污染物，因此它们是主要关注的检测项目。
非单向流主要是靠送入的洁净空气来冲淡与稀释室内、区内的污染物以维持其洁净度。因此，换气次数越大，气流流型合理，稀释效果越显著，洁净度也相应提高。所以非单相流洁净室、洁净区的送风量及相应的换气次数，是主要关注的气流测试项目。
为了获得可重复的读数，记录各测点风速的时间平均值。
换气次数：根据洁净室总风量除以法净室的容积求得。
2、温湿度
洁净室或洁净设施温、湿度测定，通常分为两个档次：一般测试和综合测试。个档次适用于处于空态的交竣验收测试，*二个档次适用于静态或动态的综合性能测试。这类测试适用于对温度、湿度性能要求比较严格的场合。
本检测在气流均匀性检测之后和空调系统调整之后进行。进行这项检测时，空调系统已经充分运转，各项状况已经稳定。每个湿度控制区至少设置一个湿度传感器，并且给传感器充分的稳定时间。所做测量应适合实际使用的目的，待传感器稳定之后才开始测量，测量时间不少于5分钟。
3、压差
这项检测的目的是验证完工设施与周围环境之间、设施内各空间之间保持规定压差的能力。
这项检测适用于所有3种占用状态。需要定期进行这项检测。
压差的测试应在所有的门都关闭的条件下，由高压向低压、由平面布置上与外界远的里间房间开始，依次向外测试；有孔洞相通的不同等级相邻的洁净室（区），其洞口处宜有合理的气流流向等等。
压差检测要求：
（1）静压差的测定要求在洁净区内的所有门全部关闭情况下进行。
（2）在洁净平面上应从洁净度由高到低的顺序依次进行，一直检测到直通室外的房间。
（3）测管口设在室内没有气流影响的任何地方均可，测管口面与气流流线平行。
（4）所测量记录的数据应到 1.0Pa。
压差检测步骤
（1）先关闭所有的门。
（2）用微差压计测量各洁净室之间、洁净室走廊之间、走廊与外界之间的压差。
（3）记录所有数据。
压差标准要求
按照洁净室设计或工艺要求决定维持被测洁净室的正压或负压值。
（1）不同级别的洁净室或洁净区与非洁净室（区）之间的静压差，应不小于5Pa。
（2）洁净室（区）与室外的静压差，不应小于 10Pa。
（3）对于空气洁净度等级严于 5 级（100 级）的单向流洁净室在开门时，门内 0.6m 处的室内工作面含尘浓度应不大于相应级别的含尘浓度限值。
（4）若达不到以上标准的要求，应重新调整新风量、排风量、至合格为止。

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核酸检测实验室核酸检测管理
（一）标本管理。标本转运箱封闭前，须使用75%酒精或0.2%含氯剂喷洒。标本包装应符合《危险品航空运输技术细则》分类包装要求。疑似或确诊患者标本应标示有标识，并进行单转运。检测完成后的剩余标本，可在结果报告发出到达其保存时限要求后，装入密封废物转运袋中进行压力蒸汽处理，随后随其他医疗废物一起转运出实验室进行销毁处理。
（二）实验室检测管理。
1.基本要求。核酸检测应当在生物二级实验室进行，并应在生物风险评估的基础上，采取适当的个体防护措施，包括手套、口罩和隔离衣等。开展核酸检测的实验室应当制定实验室生物相关程序文件及实验室生物操作失误或意外的处理操作程序，并有记录。
2.实验前要求。应使用0.2%含氯剂或75%酒精进行桌面、台面及地面。液需每天新鲜配制，不** 过。转运至实验室的标本转运桶应在生物柜内开启。转运桶开启后，使用0.2%含氯剂或75%酒精对转运桶内壁和标本采集密封袋进行喷洒。取出标本采集管后，应先检查标本管外壁是否有破损、管口是否泄露或是否有管壁残留物。确认无渗漏后，推荐用0.2%含氯剂喷洒、擦拭样品管外表面（此处不建议使用75%酒精，以免破坏标本标识）。如发现渗漏应立即用吸水纸覆盖，并喷洒有效氯含量为0.55%的含氯剂进行处理，不得对标本继续检测操作，做好标本不合格记录后需立即进行密封打包，压力蒸汽处理后销毁。
如为采样管为非灭活管，实验室操作人员在进行标本热灭活时，温浴前需旋紧标本采集管管盖，必要时可用封口膜密闭管盖；温浴过程中可每隔10分钟将标本轻柔摇匀1次，以保证标本均匀灭活；温浴后标本需静置至室温至少10分钟使气溶胶沉降，随后再开盖进行后续核酸提取。
3.核酸提取和检测要求。标本进行核酸提取和检测时应尽可能在生物柜内进行操作。如为打开标本管盖或其他有可能产生气溶胶的操作，则必须在生物柜内进行。
4.实验结束后清洁要求。需对实验室环境进行清洁，可能的核酸污染。
（1）实验室空气清洁。实验室每次检测完毕后，可采用可移动或者固定紫外灯进行紫外照射2小时以上。必要时可采用核酸剂等试剂实验室残留核酸。
（2）工作台面清洁。每天实验后，使用0.2%含氯剂或75%酒精进行台面、地面清洁。
（3）生物柜。实验使用后的耗材废弃物放入医疗废物垃圾袋中，包扎后使用0.2%含有效氯液或75%酒精喷洒其外表面。手后将垃圾袋带出生物柜放入实验室废弃物转运袋中。架、实验台面、移液器等使用75%酒精进行擦拭。随后关闭生物柜，紫外灯照射30分钟。
（4）转运容器。转运及存放标本的容器使用前后需使用0.2%含氯剂或75%酒精进行擦拭或喷洒。
（5）塑料或**玻璃材质物品清洁：使用0.2%含氯剂或或过氧化氢擦拭或喷洒。

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核酸检测实验室管理基本要求
（一）实验室资质要求。开展核酸检测的实验室，应当符合《病原微生物实验室生物管理条例》（令*424号）和《医疗机构基因扩增检验实验室管理办法》（卫办医政发〔2010〕194号）有关规定，具备经过卫生健康行政部门审核备案的生物二级及以上实验室条件，以及基因扩增检验实验室条件。立设置的医学检验实验室还应当符合《医学检验实验室基本标准（试行）》《医学检验实验室管理规范（试行）》等要求。
（二）实验室分区要求。原则上开展核酸检测的实验室应当设置以下区域：试剂储存和准备区、标本制备区、扩增和产物分析区。这3个区域在物理空间上应当是完全相互立的，不能有空气的直接相通。各区的功能是：
1.试剂储存和准备区：贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混合液的制备，以及离心管、吸头等消耗品的贮存和准备。
2.标本制备区：转运桶的开启，标本的灭活（适用时），核酸提取及其加入至扩增反应管等。
3.扩增和产物分析区：核酸扩增和产物分析。根据使用仪器的功能，区域可适当合并。如采用标本加样、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪，标本制备区、扩增和产物分析区可合并。
（三）主要仪器设备。实验室应当配备与开展检验项目相适宜的仪器设备，包括核酸提取仪、PCR扩增仪、生物柜、病毒灭活设备（适用时，如水浴锅等）、保存试剂和标本的冰箱和冰柜、离心机、不间断电源（UPS）或备用电源等。
（四）实验室检测。实验室接到标本后，应当在生物柜内对标本进行清点核对。按照标准操作程序进行试剂准备、标本前处理、核酸提取、核酸扩增、结果分析及报告。实验室应当建立可疑标本和阳性标本复检的流程。
1.试剂准备。应当选择药品监督管理部门批准的试剂，并在选择标本采样管和核酸提取试剂时，使用试剂盒说明书上建议的配套标本采样管和提取试剂。核酸提取方法与标本保存液和灭活方式相关，有些核酸提取试剂（如磁珠法或者一步法），容易受到胍盐或保存液中成分的影响，特别是一步法提取多需要使用试剂厂家配套的标本采样管。
2.标本前处理。已经使用含胍盐的灭活型标本采样管的实验室，这一环节*进行灭活处理，直接进行核酸提取，而使用非灭活型标本采样管的实验室，则有56℃孵育30分钟热灭活的处理方式。
3.核酸提取。将灭活后的标本取出，在生物柜内打开标本采集管加样。核酸提取完成后，立即将提取物进行封盖处理。在生物柜内将提取核酸加至PCR扩增反应体系中。
4.核酸扩增。将扩增体系放入扩增仪，核对扩增程序是否与试剂说明书相符，启动扩增程序。扩增后反应管不要开盖，直接放于垃圾袋中，封好袋口，按一般医疗废物转移出实验室处理。

深圳市中净环球净化科技有限公司是一家专业从事洁净室系统设计、施工及洁净室设备生产、销售，并提供专业化配套服务的高科技企业，公司始终秉承“以人才为基础，让科技服务于客户，为社会发展做贡献”经营理念，全心全意的为客户创造较优质产品，提供满意的服务。公司自成立以来，凭借自主创新的精神，开拓进取的科学管理，立志发展成为全国较具竞争力的行业**企业之一。（提供净化工程、净化产品、节能环保、LED车间、SMT车间、食品化妆品车间咨询、设计、施工）        
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