苏州病原DNA提取 使用方便简单

如果血浆病原DNA提取试剂盒中提取的DNA溶液OD260/OD280比值小于1.6，通常说明有蛋白质或酚、多糖等的污染；如果提取的DNA溶液OD260/OD280>1.9，则表明有RNA污染。
血浆病原DNA提取试剂盒的操作步骤：
1、取出洗涤液，按以下操作：
洗涤液A：21mL加入9mL无水乙醇；42mL加入18mL无水乙醇，混匀。
洗涤液B：9mL加入21mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇，混匀。
配制好的洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。
2、取1.5mL离心管，加入200μL血液样本，再加入200μL 裂解液及40μL 消化液，振荡混匀，65℃水浴10 分钟。
3、加入150μL异丙醇（总体积的25%），混合均匀，如有半透明悬浮物，不影响DNA的提取与后续实验。
4、将吸附柱放入收集管内，将上述溶液转入吸附柱内，12,000 rpm 离心1 分钟，弃收集管内废液；
5、将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液A至吸附柱内，12,000 rpm 离心1 分钟，弃收集管内废液。
6、将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液B至吸附柱内，12,000 rpm 离心1 分钟，弃收集管内废液。
7、按每份样本40μL 取洗脱液，放置于灭菌1.5mL离心管，65℃预热。
8、将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 离心2 分钟，离去残留的洗涤液。
9、取出吸附柱，放入新的1.5 mL 灭菌离心管内，在吸附柱中心加入40 μL 预热洗脱液，静置2分钟，12,000 rpm 离心1分钟，收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。

一般来说，血清血浆的量与提取的核酸量成正比。因而，如果要提高核酸得率，可通过增加血清或血浆的量来实现。一般地，做血浆或血清核酸提取，样本量在1ml以上。如果1ml或较大量样本得不到满意的检测结果，则应及时考虑更换提取试剂盒。血浆病原DNA提取试剂盒的核酸提**率较高，1ml病人血浆样本DNA得率在85ng左右，Q的得率在72ng左右，T的得率在63ng左右，基本上都能满足下游PCR实验的需求。其检测下限为2ng/ul。如洗脱液为30ul，则需要1ml左右的血浆才能检测出来。显然，如果是健康人的血浆，1ml血浆的DNA浓度较低。因而，血浆DNA提取完成以后，应该直接做PCR。

血浆病原DNA提取试剂盒的优势：
1、从血液样本中分离基因组DNA，线粒体DNA，病毒DNA等；
2、样本制备时间少；
3、纯化的DNA具有优异的质量和产量，并且可应用于很多下游应用，包括PCR、qPCR、测序、基因分型、病毒检测、Southern印迹分析。

一般来说，质粒DNA分离要比基因组DNA分离温和。这是因为针对质粒DNA的裂解步骤需要染色体DNA与细胞蛋白片段保持结合，以防止其污染终的样品。两种类型的DNA回收都有试剂盒，甚至有可以同时纯化基因组DNA和总RNA的试剂盒。
当使用血浆病原DNA提取试剂盒分离不同血液体积样本时，能表现得较好，在于提取较高的DNA产量和纯度。

血浆病原DNA提取试剂盒采用特别的裂解液配方，可直接从新鲜、冷冻或陈旧的全血中提取高质量的基因组DNA，也可以直接提**到血液中感染的细胞DNA， 省去了一般血液DNA提取试剂盒所需的白细胞分离步骤，操作简便快速，只需几十分钟左右即可完成血液DNA提取，并且DNA提**率较高，可在200 μl 全血中提取2-5ug左右基因组DNA。血浆病原DNA提取试剂盒采用了较新的优良离子膜、裂解液和洗脱液，经过多次优化，提**到的DNA纯度较高，较大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染，可以直接应用于PCR、荧光定量PCR和各种酶切试验等。

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