DNA分选纯化试剂盒能从不同类型的水样中发现的所有微生物中分离总DNA和RNA,包括菌类和藻类,使用相同的柱子同时对RNA和DNA进行柱纯化。
DNA分选纯化试剂盒对于磁珠法而言,每增加一部分液体体积,就减少了更多的磁珠碰撞几率,而降低磁珠碰撞几率,会导致吸附率的大幅度下降。所以很多时候,虽然增加裂解液和洗涤液确实能够起到增强裂解和增强洗涤的作用,但磁珠法提取的**是磁珠吸附核酸的效率,无法保证磁珠碰撞效率是不能保证核酸提取效率的,所以单纯增加试剂使用量改善提取效果并不一定完全有效。
DNA分选纯化试剂盒的主要特点是既可以分散于液体中,也可以在外加磁场作用下以固态方式和液相分离,任何试剂体系,磁珠和液体的比例都应该是有一定阈值的,**过一定的比例,过多的磁珠将因为无法均匀分散于液体中,而丧失其分散的特性,也使得洗涤过程中无法充分增加核酸磁珠和液体接触的效率。
而过量的磁珠也会吸附更多的杂质,对于除杂的效果影响非常大。甚至有些时候,过多的磁珠会吸附蛋白酶、溶菌酶等在液体体系中起主要作用的功能成分,导致整个试剂盒效率低下。有很多时候,在提取效果不佳的时候,减少磁珠使用量,反而是提升提取效果的较好途径。
DNA分选纯化试剂盒(磁珠法)试剂储藏条件为2-8℃保存,有效期12个月。使用特别的离心吸附柱效率高地与DNA的片段结合,同时能较大限度除去蛋白质、离子及引物小片段等杂质。除了可用于PCR产物回收,对于一些酶反应液回收(酶切、连接、探针标记等)也同样适用。可回收100 bp-20 kb,DNA的片段,回收率可高达80%以上(<100 bp或>10 kbDNA的片段,回收率为30%-50%)。得到的DNA可直接用于连接、转化、酶切、测序、杂交等分子生物学实验。
提取纯化试剂盒说明:
1、纯化柱-液体输入体积:
650ul;
2、洗脱体积:
100ul;
3、10个样品的纯化时间:
45minutes。
通常情况下,DNA分选纯化试剂盒给出的参考磁珠用量都是略微过量的,因此需要增加磁珠用量改善吸附效率的情况并不多,但如果确定是磁珠用量不足导致的提取效果不好,是可以在一定范围内通过增加磁珠用量来改善提取效果的。
以GNT-02系列磁珠为例,在提取常量样本(植物组织,全血等)时,通常用量为10ul/次;在提取微量样本(如血清游离DNA,口腔拭子等)时,磁珠用量为15~20ul/次。
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